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目 录 1

第1章酶法分析 1

1.1酶及酶催化反应 1

1.1.1酶活性的概念 2

1.1.2酶催化反应的类型及酶的编号 2

1.1.3酶催化反应的特性 5

1.1.4酶催化反应的动力学 6

1.1.5影响酶催化反应的因素 13

1.2酶法分析的检测技术 16

1.2.1酶活性的测定 17

1.2.2底物的测定 18

1.2.3抑制剂及活化剂的测定 19

1.2.4酶的检测方法 20

1.3酶固定化技术与酶传感器 22

1.3.1酶固定化方法 22

1.3.2酶电极 25

1.3.3流动系统中的固定化酶 32

1.3.4固定化酶在分析流动系统中的应用 33

1.4.1细胞内酶活性的测定 38

1.4酶活性测定的应用 38

1.4.2工业过程及产品中酶的测定 40

1.4.3酶在生化分析中应用的发展趋势 45

参考文献 47

第2章蛋白质分析 48

2.1蛋白质的分类及结构 48

2.1.1蛋白质的基本组成单位——氨基酸的结构 48

2.1.2多肽的结构 48

2.1.3蛋白质的分类 50

2.2蛋白质分析的意义 56

2.3蛋白质分析方法 57

2.3.1光谱法 58

2.3.2化学方法 60

2.3.3染料结合法 63

2.3.4分离及生物分析法 67

参考文献 68

第3章免疫分析 69

3.1抗原、抗体及其反应 71

3.1.1抗原 71

3.1.2抗体 76

3.1.3抗原与抗体的反应 92

3.2免疫分析中的分离方法 96

3.2.1免疫分析对分离技术的要求 97

3.2.2分离方法的分类 97

3.2.3免疫学分离系统 98

3.3免疫分析方法的建立及其优化 102

3.3.1免疫分析中的抗体位点占据原理 102

3.3.2分析条件的优化 106

3.3.3免疫分析方法的分类 109

3.4酶免疫分析（Enzyme Immunoassy） 112

3.4.1酶标记试剂 114

3.4.2游离标记物和与抗体结合的标记物的分离 116

3.4.3固定相的选择 116

3.4.4影响酶免疫分析的因素 117

3.4.5酶免疫分析应用举例（酶免疫分析试纸用于吗啡的分析） 119

3.5荧光免疫分析 122

3.5.1荧光标记物 122

3.5.2生物体液中荧光测定的局限性 124

3.5.4均相荧光免疫分析 125

3.5.3荧光免疫分析的仪器 125

3.5.5非均相荧光免疫分析 129

3.6免疫分析在毒物学方面的应用 135

3.6.1方法及技术 135

3.6.2分析毒物学方面的应用 136

3.7免疫分析发展的趋势 139

3.7.1基因工程抗体 139

3.7.2生物素－亲和素（Biotin-(Streptavidin)Avidin Couple，简称ABC）体系的多重标记 141

3.7.3 自动化和实用的免疫分析法 142

参考文献 144

3.7.4基于温敏水凝胶的相分离免疫分析 144

第4章核酸分析 146

4.1脱氧核糖核酸及核糖核酸的结构 146

4.1.1碱基、核苷及核苷酸 147

4.1.2 DNA的结构 148

4.1.3 RNA的结构 151

4.2核酸的定量及结构分析 152

4.2.1免疫化学法 152

4.2.2色谱及电泳法 156

4.2.3光谱法 156

4.3 小分子与核酸相互作用的研究 164

4.3.1小分子与核酸的相互作用模式 165

4.3.2小分子药物与核酸的相互作用 170

4.3.3核酸小分子探针的研究 172

4.4 DNA序列的测定 176

4.4.1人类基因组项目（Human Genome Project） 177

4.4.2特异性化学裂解法快速测定DNA序列 177

4.4.3 Sanger链终止DNA测序法 181

4.4.4高效毛细管凝胶电泳及超薄板凝胶电泳法 182

4.4.5非凝胶DNA测序研究进展 184

4.5.2基因诊断的原理、意义 187

4.5核酸分子杂交分析与基因诊断 187

4.5.1核酸分子杂交的概念及原理 187

4.5.3基因诊断的途径 189

4.5.4基因探针（包括放射性及非放射性同位素标记法） 190

4.5.5探针的标记 197

4.5.6基因诊断的实验技术和方法 203

参考文献 210

第5章氨基酸分析 211

5.1氨基酸的基本结构及性质 211

5.1.2氨基酸的异构化 213

5.1.1氨基酸的分类 213

5.1.3氨基酸的离子特性 214

5.1.4氨基酸在生物体内的转化 217

5.1.5肽 218

5.2氨基酸的定量斑点分析 220

5.2.1斑点显色分析法 220

5.2.2斑点荧光分析法 220

5.3色谱方法 221

5.3.1离子交换色谱法 221

5.3.2反相色谱分析法 224

5.3.3气相色谱法（GC） 226

5.3.4氨基酸的电泳分析法 227

5.4基于氨基酸选择性反应的分析方法 228

5.4.1显色分析法 228

5.4.2荧光方法 228

5.4.3微生物方法 228

5.4.4酶分析法 229

5.5氨基酸分析中存在的问题及发展趋势 230

参考文献 231

6.1糖的结构 232

第6章糖的分析 232

6.2糖的化学分析法 233

6.2.1羰基的反应 234

6.2.2多糖的结构分析 235

6.3糖的酶法分析 239

6.3.1基于葡萄糖氧化酶的葡萄糖分析 239

6.3.2基于葡萄糖脱氢酶或己糖激酶的葡萄糖分析法 241

6.3.3其它己糖分析方法 242

6.4.1纸色谱及薄层色谱法 243

6.4糖混合物的分离鉴定 243

6.4.2气相色谱法 244

6.4.3高效液相色谱法（HPLC） 246

6.4.4高效毛细管电泳法（HPCE） 246

参考文献 247

第7章 生物大分子分离纯化技术 248

7.1生物样品的常规分离纯化方法 248

7.1.1透析 248

7.1.2微过滤 250

7.1.3盐析法 251

7.1.4冷冻干燥 252

7.1.5离心 253

7.2生化分析样品的准备与预处理 257

7.2.1样品的类型、采集及保存 257

7.2.2酶样品的准备 260

7.3电泳法 264

7.3.1基本原理 264

7.3.2影响电泳分离的因素 265

7.3.3聚丙烯酰胺凝胶电泳 266

7.3.4琼脂糖凝胶电泳 272

7.3.5高效毛细管电泳 276

7.4液相色谱法 287

7.4.1排阻色谱 288

7.4.2亲和层析 293

7.4.3离子交换色谱 296

7.4.4反相及疏水作用色谱法 298

7.4.5液－液分配色谱 298

7.4.6场流分级分离法 299

7.4.7灌注层析法 299

参考文献 302