免疫学常用实验技术PDF电子书下载

目 录 1

第一章多克隆抗体制备 1

第一节动物免疫与采血 1

一、免疫原 1

二、佐剂 2

三、动物选择 2

四、免疫方法 3

五、免疫动物采血 3

六、抗原免疫实例 4

第二节抗体纯化 5

一、盐析法 5

二、凝胶柱层析 6

三、应用举例——重组蛋白抗体制备 7

第三节抗体保存 10

第二章单克隆抗体制备 11

一、试剂与器材 11

二、实验流程 13

三、关键点 15

四、应用举例 16

第三章酶免疫测定技术 18

一、实验原理 18

二、试剂与材料 20

三、基本流程 20

四、关键点 22

第四章放射标记技术 23

第一节抗原放射性核素标记 23

一、氯胺T标记法 23

二、Iodogen标记法 24

三、125I标记复合物的分离 25

第二节放射免疫分析技术 26

一、实验原理 26

二、主要技术条件 26

第三节免疫放射分析 28

第四节应用举例 29

一、人卵泡休止素放射免疫分析 29

二、人卵泡休止素免疫放射分析 30

三、关键点 31

第五节免疫细胞受体放射分析 31

第五章免疫细胞化学技术 35

二、器材准备 36

一、试剂配制 36

三、实验基本流程 37

四、关键点 41

五、常见问题及解决办法 43

六、应用举例 44

第一节凝集反应 46

一、直接凝集反应 46

第六章经典抗原抗体反应 46

二、间接凝集反应 48

第二节沉淀反应 49

一、单向免疫扩散试验 49

二、双向免疫扩散试验 50

第三节补体的测定 51

一、血清补体总活性测定 51

二、C4溶血活性的测定 52

第四节循环免疫复合物（CIC）的测定 53

第一节抗原粗分离 55

第七章抗原分离、纯化与鉴定 55

第二节抗原精制 56

一、吸附层析 56

二、离子交换层析 57

三、凝胶过滤层析 59

四、亲和层析 61

五、高效液相色谱法 63

六、离心法 63

第三节抗原性质鉴定 64

一、离子交换层析分离血清蛋白抗原 65

第四节应用举例 65

二、亲和层析法纯化甲胎蛋白 66

第八章免疫印迹 68

第一节蛋白质抗原电泳分离 68

一、样本处理 68

二、凝胶的选择 69

三、蛋白标准品的选择 70

第二节蛋白质的转膜 71

一、半干式电转印 71

一、抗体的选择 72

二、湿式电转印 72

第三节杂交 72

二、封闭 73

三、抗体杂交 73

第四节检测 74

一、放射性核素检测 74

二、辣根过氧化物酶——ECL法 74

三、碱性磷酸酶法 75

四、关键点 75

第五节应用举例 76

第九章免疫沉淀 78

一、细胞裂解 79

二、免疫沉淀抗原－抗体复合物 80

三、抗原－抗体复合物法应用举例 81

四、三分子复合物法应用举例 83

第十章免疫细胞分离 86

第一节外周血白细胞分离 86

一、低渗分离 86

二、聚蔗糖－泛影葡胺分离法 88

三、聚乙烯吡咯烷酮硅胶分离法 89

一、腹腔巨噬细胞分离 90

第二节单核巨噬细胞分离 90

二、脾巨噬细胞分离 91

三、单核细胞纯化 92

第三节T、B淋巴细胞选择性分离 93

一、E花环分离T细胞 93

二、尼龙毛分离T细胞 94

三、B细胞分离 95

二、磁化细胞分离器分离法 96

第四节NK细胞分离 96

一、Percoll不连续密度梯度分离法 96

第五节中性粒细胞分离 98

一、小量分离法 98

二、大量分离法 98

第六节树突状细胞分离 99

第十一章流式细胞仪检测技术 101

一、实验原理 101

二、实验应用 102

三、实验方法 103

四、应用举例 106

五、关键点 108

第十二章淋巴细胞转化试验 109

一、试剂配制 110

二、材料准备 110

三、基本流程 111

四、关键点 112

五、B淋巴细胞增殖实验 113

一、放射性核素释放法 114

第十三章细胞毒实验技术 114

第一节NK细胞活性测定 114

二、乳酸脱氢酶释放法 115

第二节 细胞毒性T细胞功能测定 117

第三节补体依赖性细胞毒试验 118

第十四章吞噬功能及溶血空斑试验 119

一、中性粒细胞吞噬功能测定 119

二、小鼠巨噬细胞吞噬功能测定 120

四、小鼠B细胞溶血空斑形成试验 121

三、人巨噬细胞吞噬功能测定 121

第十五章细胞因子活性检测 124

一、IL-1生物学活性检测 124

二、IL-2生物学活性检测 125

三、IL-4生物学活性检测 127

四、IL-6生物学活性检测 128

五、IL-8生物学活性检测 128

六、IL-10生物学活性检测 129

七、肿瘤坏死因子生物学活性检测 130

一、普通光学显微镜观察方法 132

第十六章免疫细胞凋亡 132

第一节细胞形态学观察法 132

二、荧光显微镜观察方法 134

第二节寡核苷酸片段检测法 136

一、普通琼脂糖凝胶电泳法 136

二、定量琼脂糖凝胶电泳法 138

三、ELISA检测法 140

第三节流式细胞仪 141

一、PI单染色法 141

二、Hoechst 33342/PI双染色法 142