色谱法 2PDF电子书下载

目录 1

第一章 亲和色谱法 1

第一节 基本原理 1

第二节 载体的选择 2

一、琼脂糖凝胶 2

二、聚丙烯酰胺凝胶 3

三、葡聚糖凝胶 3

二、配基上的化学基团 4

一、配基与所要分离的生物高分子间的亲和力 4

第三节 配基的选择 4

四、多孔玻璃 4

三、共价结合的配基 5

四、疏水的配基 5

第四节 亲和吸附剂的制备 6

一、多糖类载体 6

（一）溴化氰活化及偶联法 7

（二）水溶性碳二亚胺的偶联作用 8

（三）N－羟基琥珀酰亚胺活化酯的偶联作用 8

（四）偶氮键的偶联作用 9

（五）巯基琼脂糖 10

（七）琼脂糖的酰肼衍生物 11

（六）琼脂糖凝胶的多价“手臂” 11

（八）双环氧活化法 12

二、聚丙烯酰胺载体 12

三、多孔玻璃载体 13

第五节 吸附和洗脱 13

一、吸附 13

（三）氨乙基衍生物的制备 13

（二）酰肼衍生物的制备 13

（一）羧基衍生物的制备 13

二、洗脱 14

第六节 应用举例 14

一、酶 14

二、抗体及抗原 15

三、结合蛋白和输送蛋白 16

四、受体蛋白 16

五、细胞及病毒 16

六、刀豆球蛋白A和糖蛋白 16

参考文献 17

第一节 基本原理 19

第二章 逆流分溶法 19

第二节 实验 23

一、仪器 23

二、操作方法 25

三、溶剂系统 27

第三节 操作 30

第四节 分溶曲线的绘制 32

第五节 数据处理 33

参考文献 33

一、粘度的定义 35

二、泊稷叶定律 35

第三章 粘度法 35

第一节 基本原理 35

三、各种粘度的定义与符号 36

四、蛋白质溶液的粘度与浓度及温度的关系 37

五、粘度与分子形状的关系 37

六、特性粘度与分子量的关系 39

七、非牛顿型粘度 40

第二节 粘度计的结构与操作 41

二、粘度的测定 42

一、结构 42

第三节 奥氏粘度计 42

三、奥氏粘度计的变型 43

第四节 水平式粘度计 44

一、结构 44

二、粘度测定及其注意之点 45

第五节 毛细管粘度计的误差讨论 46

一、动能校正 46

二、尾端校正 46

第六节 蛋白质溶液的配制及有关问题 47

一、溶液的配制与稀释 47

三、其他因素引起的误差 47

二、蛋白质浓度的测定 48

附录毛细管的选择 48

第四章 光散射法 49

第一节 基本原理 49

第二节 仪器的装置及校验 55

一、光源 55

二、入射光束 56

三、散射池和水池 56

四、散射光束及散射光强测量系统 56

六、仪器对称性的检验 57

五、仪器的调整 57

一、除尘 58

第三节 实验及数据处理 58

二、校正因子 59

三、参比标准 60

四、蛋白质折射率增量及溶液浓度的测定 60

五、干涉仪的使用 62

六、测定 63

七、数据处理实例 64

附表 66

八、误差的估计 66

参考文献 67

第五章 高效液相色谱法 68

第一节 引言 68

第二节 基本原理 69

一、溶质在色谱柱中的滞留 69

二、色谱柱的选择性 69

三、色谱柱的效率 70

四、色谱分析的分辨率及其控制的一般原则 70

一、输液泵 73

第三节 主要设备 73

二、加样系统 74

三、色谱柱 74

四、检测器 76

第四节 流动相 78

一、溶剂的物理性质 78

二、溶剂的极性 80

三、溶剂的选择性 81

四、溶剂在使用前的处理 82

二、液－固色谱法中流动相的选择 83

一、吸附剂与溶质的相互作用 83

第五节 液－固色谱法 83

三、液－固色谱法的应用 86

第六节 键合相色谱法 86

一、正常相色谱法 87

二、反相色谱法 87

三、键合相色谱法的应用 90

第七节 离子配对色谱法 92

第八节 离子交换色谱法 94

一、离子交换色谱的固定相 95

二、离子交换色谱的流动相 96

三、离子交换色谱的应用 97

第九节 体积排阻色谱法 98

第十节 色谱分析中的几个实际问题 100

一、样品的制备 100

二、固定相和流动相的选择 102

三、色谱峰的鉴别 104

四、色谱峰的定量分析 105

参考文献 107

第六章 气相色谱法 110

第一节 引言 110

第二节 气相色谱仪器装置 111

一、载气 112

二、进样 113

三、色谱柱 114

四、温度控制 114

五、鉴定器 115

六、记录器 120

第三节 气相色谱原理 121

一、线性气相色谱法 121

二、保留值的测量 122

三、塔板理论 125

四、速率理论 126

五、色谱峰的分离 126

第四节 担体和固定液 128

一、吸附剂 128

二、担体 129

三、多孔聚合物 132

四、固定液 133

五、色谱柱的填充和老化 137

六、毛细管色谱柱 140

第五节 定性和定量分析 141

一、定性分析 142

二、定量分析 143

第六节 气相色谱法在生物化学中的应用 146

一、脂类的分析 147

二、糖的分析 151

三、甾体化合物的分析 157

四、尿香草扁桃酸和高香草酸的测定 168

五、氨基酸的分析 174

六、嘧啶、嘌呤和核苷的分析 183

参考文献 184