组织学与胚胎学实验技术PDF电子书下载

第一章 组织标本切片和染色技术 1

第一节 标本取材与固定 1

一、标本取材 1

二、标本固定 4

第二节 脱水、透明、浸蜡和包埋 9

一、脱水 9

二、透明 11

三、标本脱水与透明的关系 11

四、浸蜡和包埋 12

第三节 组织切片技术 13

一、石蜡切片 13

二、冰冻切片 19

第四节 切片的染色与染料 20

一、生物学染色与染料 20

二、苏木精-伊红染色 26

三、封固 30

第五节 特殊标本的制备 32

一、脱钙骨标本 32

二、眼球标本的制备 35

三、微小标本的制备 38

四、胚胎标本的制备 39

五、涂片标本 41

第六节 常用的特殊染色 42

一、结缔组织染色 42

二、细胞染色 52

三、神经组织染色 59

第七节 激光捕获显微切割技术 68

一、原理 68

二、实验方法 69

三、实验操作的影响因素 69

四、激光捕获显微切割系统的优点 70

五、激光捕获显微切割系统的应用范围 70

六、激光捕获显微切割技术的最新进展 71

附录：主要试剂与溶液的配制 72

第二章 光学显微镜技术 77

第一节 普通光学显微镜 77

一、显微镜的几何光学成像原理 77

二、物镜 78

三、显微镜的照明聚光镜 79

四、视场光阑与孔径光阑 80

五、目镜 81

六、普通光学显微镜的操作要点 81

第二节 荧光显微镜 82

一、荧光的基础知识 82

二、荧光显微镜 85

三、荧光显微镜的基本操作步骤 88

四、荧光显微镜的操作注意事项 89

五、荧光显微镜标本制作特点和观察要求 89

第三节 倒置显微镜 90

一、光学与结构特点 90

二、V型与U型倒置显微镜 90

第四节 相差显微镜 91

一、基本原理 91

二、配置 92

三、操作 92

四、相差图像特点及相差装置进展 93

第五节 其他光学显微镜技术 93

一、暗视野显微镜 93

二、近场光学显微镜 94

三、原子力显微镜 97

第六节 激光扫描共聚焦显微镜 101

一、基本原理 102

二、激光扫描共聚焦显微镜的主要特点 103

三、激光扫描共聚焦显微镜的主要应用 104

四、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构 105

五、激光扫描共聚焦显微镜的主要操作步骤 107

六、双光子（多光子）激光共聚焦显微镜 107

第七节 显微镜摄影与显微摄影技术 108

一、显微摄影的基本原理 109

二、显微镜摄影中CCD的选择 110

三、显微摄影技术应用 111

四、CCD成像的操作步骤 112

第八节 图像分析技术 113

一、图像分析处理的基本概念 113

二、图像分析系统的基本配置 116

三、图像分析的医学应用 118

第三章 组织与细胞化学技术 120

第一节 总论 120

一、组织与细胞化学的技术要求 120

二、组织与细胞化学的研究内容 120

三、组织与细胞化学的研究方法 121

第二节 碳水化合物和核酸显示技术 122

一、碳水化合物的显示技术 122

二、核酸的显示技术 128

第三节 脂类和含铁血黄素显示技术 132

一、脂类 132

二、含铁血黄素 134

第四节 蛋白质和氨基酸的显示技术 135

一、蛋白质的四氮化联邻茴香胺显示法 135

二、蛋白质巯基（—SH基团）的铁-铁氰化物显示法 135

第五节 酶组织与细胞化学 136

一、影响酶活性的几种因素 136

二、常用酶组织与细胞化学反应显示的基本理论和方法 138

三、几种常用的酶组织与细胞化学技术 141

附录：主要试剂与溶液的配制 172

第四章 免疫组织化学技术 175

第一节 免疫组织化学技术的基本原理和分类 175

一、免疫组织化学技术的基本原理 175

二、免疫组织化学技术的分类 176

第二节 免疫荧光组织化学技术 176

一、免疫荧光组织化学技术的基本原理 176

二、免疫荧光组织化学技术的基本方法 177

三、非特异性荧光染色的抑制或消除 179

第三节 免疫酶组织化学技术 179

一、免疫酶组织化学技术的基本原理 179

二、免疫酶组织化学技术的基本方法 180

三、注意事项 183

第四节 亲和免疫组织化学技术 185

一、亲和免疫组织化学技术的基本原理 185

二、亲和免疫组织化学技术的基本方法 185

三、注意事项 187

第五节 免疫胶体金技术 187

一、免疫胶体金染色法 187

二、蛋白A胶体金法 188

三、免疫金银法 189

第六节 组织与细胞标本的制备和抗原修复 190

一、取材 190

二、固定 190

三、包埋 190

四、切片 191

五、抗原修复及应用 191

第七节 常用免疫组织化学技术实验步骤 192

一、免疫荧光法 192

二、免疫酶技术 194

三、亲和免疫组织化学技术 197

四、免疫胶体金技术（光镜水平） 199

第八节 免疫组织化学技术方法的注意事项 201

一、免疫组化染色方法的选择 201

二、非特异染色或背景的控制 202

附录：主要试剂与溶液的配制 204

第五章 原位杂交组织化学技术 213

第一节 原位杂交概述 213

一、基本原理 213

二、基本类型 213

三、发展特点 215

第二节 核酸探针 216

一、核酸探针的种类 216

二、核酸探针的标记 218

第三节 普通原位杂交技术 220

一、基本过程 221

二、实验步骤 223

三、检测与分析 224

四、影响因素 225

五、对照实验 227

第四节 荧光原位杂交 227

一、FISH的标记物 229

二、FISH的探针 229

三、实验步骤 231

四、FISH的技术类型 232

五、多色荧光原位杂交技术 233

第五节 比较基因组杂交 234

一、基本原理 234

二、技术特点 236

三、实验步骤 236

四、微阵列CGH技术 239

第六节 原位PCR 240

一、基本原理与技术类型 241

二、实验步骤 243

第七节 引物原位标记 244

一、基本原理 244

二、技术特点 246

三、实验步骤 247

第八节 原位杂交在胚胎发育研究中的应用 248

一、胚胎样品的制备 248

二、整胚原位杂交实验步骤 249

三、胚胎切片的原位杂交实验步骤 250

四、胚胎原位杂交时的几个主要问题 251

附录：主要试剂与溶液的配制 252

第六章 细胞与组织培养技术 256

第一节 细胞培养的基本原理 256

一、细胞培养实验室设计原则和常用设备 256

二、无菌室的灭菌 257

三、器械的清洗和灭菌 258

四、细胞培养的一般条件 259

五、细胞原代培养和传代培养 262

六、培养细胞的计数与活力测定 263

七、细胞培养中的污染问题 264

第二节 细胞冻存和复苏 265

一、细胞冻存技术 265

二、细胞复苏技术 267

三、细胞的运输和收到后的处理 268

第三节 细胞和组织培养常用方法 268

一、单个（群）细胞培养法 269

二、组织和器官培养法 280

三、全胚胎培养法 281

第四节 细胞的特殊培养方法 286

一、支持物培养法 286

二、悬浮培养法 288

三、单细胞分离（克隆）培养法 288

四、大规模细胞培养技术简介 289

附录：常用细胞培养液的配制与灭菌 296

第七章 体视学 300

第一节 体视学的原理 300

一、二维图像与三维结构之间的关系 300

二、几何探针 301

三、卡瓦列里原理 302

四、随机抽样 305

第二节 常用体视学方法的应用 308

一、特征物断面计数与轮廓密度 308

二、长度密度和总长度 311

三、面积分数和平均面积 313

四、体积分数和总体积 313

五、交叉点密度和边线密度 314

六、表面积密度和总表面积 315

七、数目测量 316

八、体视学技术与图像分析技术的关系 324

第八章 电子显微镜技术 326

第一节 概述 326

一、透射电子显微镜 326

二、扫描电子显微镜 327

三、超高压电子显微镜 327

四、分析型电子显微镜 327

五、扫描隧道显微镜 327

第二节 透射电子显微镜技术及生物样品制备 328

一、透射电子显微镜的结构 328

二、超薄切片技术 329

三、其他生物样品制备技术 337

第三节 扫描电子显微镜技术及生物样品制备 339

一、扫描电子显微镜的结构及原理 339

二、扫描电子显微镜生物样品制备技术 339

第四节 透射电镜的观察与记录 346

第五节 冰冻蚀刻电镜技术 348

一、物理固定 348

二、物理固定方法 349

三、样品制备基本步骤 350

四、冰冻置换法 352

第六节 电镜组织化学与细胞化学技术 352

一、酶组织化学的特点 353

二、样品制备 353

三、常用电镜酶组织细胞化学方法 354

第七节 免疫电镜技术 357

一、免疫电镜技术的特点 357

二、几种常用免疫电镜技术 360

附录：主要试剂与溶液的配制 367

第九章 流式细胞检测技术 369

第一节 流式细胞仪原理和组成 369

一、流式细胞术分析的基本原理 369

二、流式细胞仪的基本结构 370

第二节 流式细胞仪常用的荧光素 373

第三节 流式细胞仪样本制备和标记方法 373

一、实验准备阶段 373

二、样本处理 373

三、荧光染色 373

四、细胞分选 374

第四节 流式细胞仪的数据处理 374

一、数据的显示 374

二、数据的分析 375

第五节 流式细胞仪分选技术 376

第六节 流式细胞仪的应用 377

一、细胞周期检测 377

二、细胞凋亡检测 378

三、细胞增殖检测 378

四、细胞膜标记检测——淋巴细胞亚群 379

五、细胞质标记检测——细胞内细胞因子检测 380

六、肿瘤干细胞的检测和分选 380

七、染色体分析 381

八、精子分选 381

九、阳性转染细胞的分选 383

附录：常见荧光素的性质 384

第十章 生物芯片技术 387

第一节 生物芯片技术概述 387

一、生物芯片技术的发展史 387

二、生物芯片的分类和应用 388

第二节 组织芯片技术 389

一、组织芯片的原理 389

二、石蜡组织芯片的制备 389

三、组织芯片的应用 392

四、组织芯片的优点和存在的问题 394

第三节 基因芯片 395

一、基本原理 395

二、芯片制作 395

三、样品制备 398

四、实验步骤 398

五、生物分子杂交 399

六、信号的检测及分析 401

七、数据分析 401

八、基因芯片的应用领域 402

第四节 抗体芯片 403

一、蛋白质表达谱检测 403

二、蛋白质磷酸化的检测 404

三、蛋白质相互作用的检测 404

第五节 其他芯片技术 405

一、微流控芯片 405

二、microRNA表达芯片 406

附录：主要试剂与溶液的配制 408

第十一章 活体动物体内功能成像技术 410

第一节 活体动物体内可见光成像技术 410

一、生物发光成像技术 411

二、活体动物荧光成像技术 414

三、生物发光成像与荧光成像的比较 416

四、活体动物可见光成像原理与操作流程 418

第二节 活体动物放射性核素成像技术 419

一、PET/SPECT的技术原理 419

二、小动物PET/SPECT技术的优势 421

三、应用领域 422

第三节 多模式分子成像平台 427

一、活体动物光学成像系统与核素成像的融合 427

二、核素成像与CT、MRI的融合 428

第十二章 干细胞技术 431

第一节 成体干细胞 432

一、造血干细胞的分离、培养和鉴定 432

二、骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定 436

三、神经干细胞的分离、培养和鉴定 439

四、表皮干细胞的分离、培养和鉴定 440

五、脂肪干细胞的分离、培养和鉴定 442

六、少突胶质干细胞的分离、培养和鉴定 445

七、胰腺干细胞的分离、培养和鉴定 448

第二节 胚胎干细胞 454

一、小鼠胚胎干细胞的分离、培养和鉴定 454

二、人胚胎干细胞分离、培养及鉴定 459

三、胚胎生殖细胞的分离、培养和鉴定 463

第三节 诱导的多潜能干细胞 468

一、概述 468

二、诱导的多潜能干细胞的获得 468

三、诱导的多潜能干细胞的鉴定 470

四、影响诱导的多潜能干细胞建系的因素 471

五、诱导的多潜能干细胞的应用 471

第四节 肿瘤干细胞 471

一、肿瘤干细胞的概念 472

二、肿瘤干细胞的生物学特性 472

三、肿瘤干细胞的分选与鉴定 473

四、信号通路与肿瘤发生 474

五、肿瘤干细胞的起源 475

第五节 干细胞在组织工程中的应用 475

一、组织工程的研究内容 475

二、干细胞在组织工程中的应用 477

附录：主要试剂与溶液的配制 479

第十三章 细胞核移植技术及应用 481

第一节 细胞核移植的相关细胞 481

一、细胞核移植研究的初衷及演变 482

二、细胞核供体的准备 483

三、细胞核受体胞质的准备 487

四、供体细胞核与受体卵母细胞的相互作用 491

第二节 细胞核移植胚胎的构建 493

一、直接注射法 493

二、电融合法 495

三、激活重组胚 496

第三节 核移植胚胎的培养 499

一、早期胚胎发育过程中的基本生命现象 500

二、培养液的种类和基本成分 500

三、体外培养系统 503

第四节 体细胞核移植基本操作步骤 505

一、实验准备工作 505

二、细胞核移植的基本步骤 508

第五节 细胞核移植技术的应用 511

一、制备人胚胎干细胞 511

二、促进转基因动物生产 512

三、加深核质互作关系的研究 513

四、提高牲畜育种的效率和扩大珍稀动物的数量 513

第十四章 体外受精及其衍生辅助生殖技术 515

第一节 体外受精-胚胎移植 515

一、体外受精的发展历史 515

二、体外受精的应用价值 516

三、小鼠体外受精步骤 516

四、胚胎移植 522

五、精子的体外获能和顶体反应 524

第二节 单精子卵浆内注射 529

一、单精子卵浆内注射的发展历史 529

二、小鼠单精子卵浆内注射的步骤 530

第三节 植入前基因诊断 535

一、植入前基因诊断取材 536

二、植入前基因诊断分析 537

第四节 胚胎冷冻 538

一、冷冻保护剂的分类 539

二、常用冷冻方法 539

中英文名词对照索引 542

英中文名词对照索引 555