医学细胞生物学与遗传学实验教程PDF电子书下载

第一部分 医学细胞生物学 1

上篇 基本实验 1

第一章 显微镜的构造和使用 1

实验1-1普通光学显微镜的构造和使用方法、细胞的基本形态结构的观察 1

实验1-2倒置相差显微镜的构造与使用 6

实验1-3显微镜测微尺的使用 8

第二章 流式细胞仪技术与应用 14

实验2-1流式细胞仪结构原理及应用 14

实验2-2流式细胞仪检测细胞周期 18

实验2-3流式细胞仪检测细胞凋亡 20

实验2-4流式细胞仪检测细胞中抗原 21

第三章 细胞器结构的观察与分离 24

实验3-1细胞器的电镜照片及结构描述 24

实验3-2细胞器分级分离 30

第四章 细胞化学方法和细胞化学成分显示 33

实验4-1细胞化学基本理论 33

实验4-2细胞中骨架蛋白的显示与细胞形态的观察 36

实验4-3 Feulgen法显示脱氧核糖核酸 38

实验4-4甲基绿-哌洛宁显示核酸 39

实验4-5苏木素-伊红染色显示细胞核和细胞质 41

第五章 酶细胞化学 43

实验5-1酶细胞化学的基本原理 43

实验5-2碱性磷酸酶显示及用途 45

实验5-3联苯胺法显示过氧化物酶及应用 47

实验5-4詹纳斯绿显示活体细胞线粒体 48

实验5-5通过琥珀酸脱氢酶活性进行MTT检测细胞相对存活率 49

第六章 免疫化学技术 52

实验6-1免疫酶细胞化学法检测髓母细胞瘤细胞中P65蛋白的表达 52

实验6-2免疫荧光染色显示髓母细胞瘤细胞中Hesl蛋白的分布 54

实验6-3免疫组织化学法检测Hesl在胃癌组织中的表达与分布 56

第七章 细胞培养技术 60

实验7-1细胞培养的基本原理与技术 60

实验7-2细胞的原代培养 67

实验7-3传代细胞培养 69

实验7-4培养细胞的形态观察和计数 71

实验7-5细胞冻存、复苏与运输 74

实验7-6细胞克隆化培养 76

第八章 细胞行为学 78

实验8-1细胞吞噬实验 78

实验8-2细胞融合实验 80

实验8-3细胞周期 85

实验8-4小鼠减数分裂 88

实验8-5细胞周期特定时相细胞同步化方法 92

实验8-6细胞运动的观察 94

第九章 细胞衰老和凋亡的检测 98

实验9-1苏木素-伊红染色法显示凋亡细胞 98

实验9-2 Giemas染色法显示凋亡细胞 100

实验9-3凋亡细胞的原位末端转移酶标记法（TUNEL法） 101

实验9-4细胞凋亡的琼脂糖凝胶电泳检测 103

实验9-5细胞衰老的检测 105

第十章 蛋白质的分离与测定 107

实验10-1真核细胞蛋白质提取 107

实验10-2双缩脲法测定蛋白质浓度 109

实验10-3福林-酚法测定蛋白质浓度 110

实验10-4考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 111

实验10-5蛋白质印迹免疫分析（Weste blotting） 113

下篇 综合实验 116

第十一章 小鼠胚胎干细胞培养 116

实验11-1小鼠胚胎成纤维细胞的培养 116

实验11-2饲养层细胞的制备 118

实验11-3小鼠胚胎干细胞的分离及培养 119

第十二章 IL-6剥夺诱导小鼠B细胞杂交瘤细胞株7ID1细胞凋亡、观察及检测 121

实验12-1小鼠B细胞杂交瘤细胞株7TD1细胞复苏与传代培养 122

实验12-2 7TD1细胞的凋亡诱导（IL-6剥夺）及细胞收集 123

实验12-3 IL-6剥夺诱导7TD1细胞凋亡的形态特征观察 125

实验12-4 IL-6剥夺诱导7TD1细胞凋亡的DNA提取及凋亡梯状带检测 128

第十三章 白藜芦醇诱导髓母细胞瘤细胞分化观察及相关基因的检测 131

实验13-1细胞的培养与传代 131

实验13-2白藜芦醇处理前后细胞数量及形态的观察以及免疫细胞化学染色 132

实验13-3总RNA提取和分化相关基因突触素（synaptophysin）的RT-PCR检测 134

附录 137

附录一 试剂浓度的表示方法及其计算 137

附录二 常用人工合成细胞培养基的种类、化学组成及适用细胞 138

附录三 实验室常用细胞系（株） 141

附录四 离心机转数与离心力的换算表 145

医学细胞生物学部分参考文献 147

第二部分 医学遗传学 148

上篇 基本实验 148

第一章 常见人类遗传性状的分析与遗传咨询 148

实验1-1人遗传病的家系分析与讨论 148

实验1-2 Bayes法在遗传咨询中的具体应用 150

实验1-3遗传度、杂合度、多态信息量和吻合度测验 154

实验1-4遗传性疾病遗传方式的估计 157

实验1-5多基因遗传的人类皮肤纹理分析 160

实验1-6人类ABO血型的检测和遗传分析 167

实验1-7人类苯硫脲（PTC）尝味能力的遗传分析 169

实验1-8人类常见单基因性状的鉴定与群体遗传学分析 171

第二章 细胞遗传学相关的实验 175

实验2-1人类性染色质标本的制备与观察 175

实验2-2外周血淋巴细胞培养与染色体制备 177

实验2-3小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察 180

实验2-4染色体G显带技术 181

实验2-5核型分析 185

实验2-6小鼠骨髓嗜多染红细胞微核测定 187

实验2-7人类姐妹染色单体交换（SCE）标本的制备与观察（姐妹染色单体技术） 189

实验2-8荧光原位杂交 191

第三章 分子遗传学相关的实验 197

实验3-1真核生物组织及细胞基因组DNA提取 197

实验3-2组织及细胞中RNA的提取 198

实验3-3 DNA与RNA含量测定 200

实验3-4聚合酶链反应技术（PCR）体外扩增DNA片段 201

实验3-5逆转录聚合酶链反应（R-PCR） 203

实验3-6实时定量PCR（real time-PCR） 205

实验3-7 DNA序列测定 208

实验3-8质粒DNA提取 212

实验3-9限制性核酸内切酶对DNA进行酶切 215

实验3-10电泳分离酶切DNA片段 217

实验3-11 DNA片段的回收与纯化 219

实验3-12目的基因与载体片段的连接 222

实验3-13感受态细胞的制备 224

实验3-14重组DNA的转化 226

实验3-15重组质粒的筛选 227

实验3-16核酸分子杂交技术 229

下篇 综合实验 237

第四章 基因多态性分析 237

第一节 概述 237

第二节 CYP1A1基因多态性与胃癌易感性的相关性研究 237

第五章 PCR-SSCP与基因点突变检测 243

第一节 概述 243

第二节 PCR-SSCP方法检测肿瘤细胞p53基因点突变 244

第六章 肿瘤细胞中基因印记状态的检测方法 249

第一节 概述 249

第二节 胃癌组织中胰岛素样生长因子-2基因印记缺失的检测 250

第七章 肿瘤组织中p16抑癌基因表达检测 255

第一节 概述 255

第二节 RT-PCR方法检测胃癌组织中p16抑癌基因表达情况 255

第八章 肿瘤细胞中抑癌基因异常高甲基化检测与分析 260

第一节 概述 260

第二节 胃癌细胞中抑癌基因p16启动子区异常甲基化检测 261

附录 265

附录一 SAGE技术 265

附录二 基因芯片技术 267

附录三 RNAi技术 271

附录四 MicroRNA技术 274

附录五 DNA甲基化检测技术 277

附录六 生物信息学研究方法 279

医学遗传学部分参考文献 282