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第1章 绪论 1

第2章 细胞工程基础 6

2.1 细胞 6

2.1.1 细胞的基本共性 6

2.1.2 原核细胞与真核细胞 7

2.1.3 细胞增殖及其调控 13

2.1.4 病毒 20

2.2.1 概述 22

2.2 动物细胞基因工程 22

2.2.2 病毒和细胞基因的克隆 24

2.2.3 真核病毒载体 24

2.2.4 选择性标记 28

2.2.5 基因转移方法及受体细胞 29

2.2.6 暂时性基因表达 31

2.2.7 永久性基因表达 32

2.2.8 转基因动物 34

2.3 植物细胞基因工程及原生质体融合 35

2.3.1 原生质体融合 35

2.3.2 植物细胞基因工程概述 38

2.4.1 杂交瘤技术的基本原理 39

2.4 杂交瘤技术 39

2.4.2 杂交瘤细胞的建立 42

2.4.3 单克隆抗体的大规模生产 47

2.4.4 使用单克隆抗体的风险 49

2.4.5 单克隆抗体的应用 50

3.1 清洗与消毒 57

3.1.1 清洗 57

第3章 动物细胞培养技术 57

3.1.2 消毒 59

3.2 动物细胞培养基 60

3.2.1 培养基的组成 60

3.2.2 无血清培养基 61

3.2.3 培养系统对培养基设计的要求 70

3.2.4 培养基的选择 70

3.2.5 其它常用液 71

3.3 动物细胞常用培养方法 73

3.3.1 贴壁培养 76

3.3.3 细胞生长的检测 79

3.3.2 悬浮培养 79

3.3.4 微载体培养系统 90

3.3.5 包埋培养 101

3.3.6 微囊化培养 109

3.4 动物细胞冻存、复苏及运输 112

3.4.1 细胞冻存与复苏 112

3.5 昆虫细胞和病毒的培养 114

3.5.1概述 114

3.4.2 细胞的运输 114

3.5.2 昆虫细胞，杆状病毒的基本知识 116

3.5.3 昆虫细胞大量培养工艺 121

第4章 动物细胞反应工程 139

4.1 动物细胞反应的环境因素 139

4.1.1 温度 139

4.1.2 pH值 140

4.1.3 营养成分 140

4.1.6 其它因素 142

4.2 动物细胞反应过程 142

4.1.5 渗透压 142

4.1.4 溶氧及气体环境 142

4.2.1 糖代谢 143

4.2.2 蛋白质代谢 145

4.2.3 类脂代谢 147

4.2.4 核酸代谢 147

4.3 动物细胞反应工艺学 149

4.3.1 分批式培养 150

4.3.2 流加式培养 153

4.3.3 半连续式培养 154

4.3.4 连续式培养 155

4.4 动物细胞反应动力学 157

4.4.1 细胞比生长速率 157

4.4.2 营养物质比消耗速度 162

4.4.3 产物比生成速率 163

4.4.4 细胞培养过程动力学 164

4.5 细胞培养工程的放大 176

4.5.1 培养基组成 178

4.5.2 限制细胞生长的因素 180

4.5.3 污染的控制 181

4.5.4 产物表达的控制 182

4.5.5 硬件和过程设计参数 183

4.5.6 产物回收 185

第5章 动物细胞培养生物反应器 187

5.1 概述 187

5.2 气升式细胞培养生物反应器 188

5.2.1 气升式生物反应器构型及原理 188

5.2.2 反应器操作 191

5.2.3 无菌控制 191

5.2.4 过程控制及自动化 192

5.2.5 混合和传质 193

5.2.6 静压 195

5.2.7 细胞生长和产物形成 196

5.2.8 连续培养 197

5.3 中空纤维管生物反应器 199

5.4 通气搅拌生物反应器 201

5.4.1 笼式通气搅拌生物反应器 201

5.4.2 双层笼式通气搅拌器生物反应器 204

5.4.3 传递特性的分析 205

5.5 无泡搅拌反应器 209

5.5.1 膜 209

5.5.3 传质性能 210

5.5.2 膜搅拌器 210

5.5.4 材料的性能 211

5.5.5 反应器和过程开发 211

5.6 流化床生物反应器 212

5.7 陶质矩形通道蜂窝状生物反应器 213

5.8 细胞的剪切敏感性和生物反应器设计 214

5.8.1 积分剪切因子 215

5.8.2 平均剪切速度 216

5.8.3 可尔莫格罗夫（Kolmogorov）旋涡长度 217

5.8.4 旋涡长度模型 219

5.8.5 反应器设计中对剪切应力的估算 220

5.9 细胞培养灌注系统 222

5.10 动物细胞反应器的控制 225

5.11 细胞培养用微载体 229

5.11.1 概述 229

5.11.2 动物细胞贴壁生长机理 231

5.11.3 微载体的种类 233

5.11.4 国产微载体的开发 242

6.1 概述 249

第6章 植物细胞培养技术 249

6.2 基本培养技术 250

6.2.1 植物组织培养概念 250

6.2.2 材料准备 251

6.2.3 植物细胞培养基 253

6.2.4 植物细胞培养方法 257

6.3 植物细胞培养工艺 273

6.3.1 间歇培养 273

6.3.2 连续培养 273

6.3.3 固定化细胞培养 274

6.4 植物细胞培养动力学 275

6.4.1 植物细胞培养的影响因素 275

6.4.2 植物细胞培养中氧的消耗及传质动力学 282

6.4.3 固定化细胞培养的传质及反应动力学 284

6.5 植物细胞培养反应器 285

6.5.1 机械搅拌生物反应器 287

6.5.2 非机械搅拌生物反应器 288

6.5.3 鼓泡塔与气升式反应器 289

6.5.4 填充床反应器 290

6.5.5 流化床反应器 291

6.5.6 膜反应器 292

第7章 动物细胞培养的下游工程 295

7.1 预处理 295

7.1.1 沉淀 295

7.1.2 离心 295

7.1.3 过滤 297

7.2 浓缩 299

7.2.1 沉淀法 299

7.2.2 吸附/洗脱 303

7.2.3 超离心 306

7.2.4 超滤 308

7.2.5 不同浓缩方法的比较 308

7.3 动物细胞培养产物的纯化 308

7.3.1 概述 308

7.3.2 动物细胞培营养产物蛋白纯化 311

7.3.3 病毒的纯化 321

7.4 动物细胞培养病毒的灭活 325

7.4.1 灭活动力学 325

7.4.2 灭活剂 326

参考文献 331