现代植物生理生化研究技术PDF电子书下载

前言 3

第一部分 基础性技术 3

第一章　植物的水分代谢 3

第一节　植物组织自由水和束缚水含量的测定 3

第二节　植物组织水势的测定 4

第三节　植物组织渗透势的测定 5

第四节　植物组织含水量的测定 6

第五节　植物组织水分饱和亏缺的测定 7

第六节　钾离子对植物气孔开度的影响 8

第七节　植物叶片蒸腾强度的测定 8

第二章　植物的矿质代谢 10

第一节　TTC法测定植物根系活力 10

第三节　植物伤流液的收集及糖和氨基酸的测定 11

第二节　植物伤流量的测定 11

第四节　培养液中N、P、K的定量测定 12

第五节　植物对铵离子的吸收动力学 15

第六节　植物对离子的选择性吸收 16

第七节　植物组织中总氮、蛋白质氮含量的测定 17

第三章　植物的光合代谢 20

第一节　环境因子对植物光合作用的影响 20

第二节　植物光合速率的测定 21

第三节　叶绿体色素的提取、分离及理化性质 25

第四节　叶绿素含量的测定 26

第五节　植物希尔反应的观察 27

第六节　核酮糖－1,5－二磷酸羧化酶／加氧酶（Rubisco）活性的分光光度计法测定 28

第七节　Rubisco的定量分析 30

第八节　叶绿体光诱导荧光强度的测定 32

第九节　植物组织ATP酶活性测定 33

第十节　磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定 34

第十一节　RCA活性及含量的测定 36

第四章　植物的呼吸代谢 38

第一节　植物呼吸速率的测定 38

第二节　过氧化氢酶活性测定 40

第三节　苯丙氨酸解氨酶活性的测定 41

第四节　过氧化物酶活性的测定 41

第五节　多酚氧化酶活性的测定 42

第六节　果胶酶活性的测定 43

第五章　植物激素 45

第一节 乙烯含量的气相色谱法测定 45

第二节　植物激素含量的测定 46

第三节　赤霉素对α－淀粉酶的诱导形成 48

第四节　萘乙酸对植物种子萌发的影响 49

第五节　植物激素对器官脱落的调节 50

第六节　植物激素脱落酸和赤霉素的提取、分离及测定 51

第七节　GA3促进植物种子萌发 54

第八节　细胞分裂素的抗衰老作用 55

第六章　植物的生长生理 57

第一节　淀粉酶活性的测定 57

第二节　植物淀粉含量的测定 58

第三节　植物种子生命力的测定 60

第四节　植物组织中ATP含量的测定 61

第五节　植物组织中脂肪酸含量的测定 63

第六节　植物种子中主要不饱和脂肪酸的分离 64

第七节　植物组织中纤维素含量的测定 65

第八节　植物组织中可溶性糖含量测定 66

第九节　植物组织中还原糖含量的测定 67

第十节　植物种子中赖氨酸含量的测定 68

第十一节　植物种子萌发过程中的淀粉、脂肪和蛋白质的转化 69

第十二节　植物组织培养技术 71

第七章　植物生殖生理 83

第一节　植物光周期现象的观察 83

第二节　植物光周期的诱导 84

第三节　植物春化现象的观察 85

第四节　花粉的生长及其向化性 86

第五节　花粉活力的测定 87

第八章　植物的成熟和衰老生理 90

第一节　植物组织中丙二醛含量的测定 90

第二节　植物超氧化物歧化酶活性的测定 91

第三节　植物脂肪氧化酶活性的测定 92

第九章　植物的抗性生理 94

第一节　脯氨酸含量的测定 94

第二节　维生素C含量的测定 95

第三节　植物组织抗逆性的测定 96

第十章　糖类 99

第一节　碳水化合物的斐林试剂比色法测定 99

第二节　碳水化合物的蒽酮比色法测定 100

第三节　糖的颜色反应 101

第四节　酮体的生成 102

第十一章　脂类 103

第一节　磷硫铁试剂法定量测定血清总胆固醇 103

第二节　血清甘油三酯的测定 104

第三节　脂肪酸的β－氧化 105

第四节　卵磷脂的提取和鉴定 107

第十二章　蛋白质、氨基酸 108

第一节　蛋白质含量的测定 108

第二节　血清蛋白的电泳 116

第三节　血清γ－球蛋白的提纯 120

第四节　蛋白质分子量的测定 122

第五节　蛋白质的一般性质 125

第六节　蛋白质相对分子质量的测定 127

第七节 甲醛滴定法测定氨基氮 128

第十三章　酶类 130

第一节　酶作用的一般性质 130

第二节 碱性磷酸酶的提取、分离与纯化 132

第三节　碱性磷酸酶最适pH的测定 133

第四节　碱性磷酸酶最适温度的测定 134

第五节　酶促反应初速率时间范围测定 134

第六节　米氏常数（Km）和最大反应速率（Vm）的测定 136

第七节　抑制剂对酶活力的影响 138

第八节　氨基酰化酶的测定 140

第九节　酶联免疫吸附测定 143

第一节　酵母核糖核酸的提取及测定 145

第十四章　核酸 145

第二节　核酸的定量测定——定磷法 146

第三节　离子交换色谱分离核苷酸 148

第十五章 植物组织中核酸的提取与检测 151

第一节　植物组织中基因组DNA的提取与测定 151

第二节 DNA的凝胶电泳 152

第三节　植物总RNA的提取与测定 154

第四节 mRNA纯化 156

第五节 RNA的琼脂糖凝胶电泳 158

第十六章　基因克隆 160

第一节　PCR技术 160

第二节 cDNA-AFLP技术 162

第三节 cDNA文库构建技术 166

第四节 质粒DNA的提取、分离和纯化 176

第五节　大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 179

第六节　重组质粒的连接、转化及筛选 182

第七节　根癌农杆菌介导转化烟草 184

第八节 RFLP和RAPD技术 186

第九节 DNA序列的测定 188

第十节 植物基因cDNA全长的克隆 189

第十一节 基因组AFLP技术 191

第十二节　SSR和CAPS分析技术 192

第十七章　基因表达 196

第一节　克隆基因在E.coli中的表达 196

第二节 RT-PCR和定量RT-PCR 199

第三节　Southern杂交分析技术 202

第四节　Northern杂交分析技术 205

第五节　Western杂交分析技术 208

第六节　植物组织原位杂交分析技术 210

第七节　酵母双杂交分析技术 219

第八节　芯片杂交分析技术 225

第二部分　综合性技术 233

第十八章 植物氮素缺乏的生理机理研究 233

第一节　植物的日常培养与管理 233

第二节　植物根系的表型分析 233

第三节　植物根系活力的测定 234

第四节　植物硝酸还原酶活性的测定 237

第五节　植物细胞有丝分裂指数的测定 239

第十九章　植物光合生理的研究 241

第一节　植物叶片光合速率及其环境因子的测定 241

第二节　植物光响应曲线和CO2响应曲线的制作 243

第三节　植物叶面积的测定 246

第一节　IAA和ABA的生物鉴定 248

第二十章　植物激素的生物鉴定 248

第二节　GA3、CTK、ABA的生物鉴定 250

第二十一章 植物生长调节剂在植物生长发育中的作用 252

第一节　植物生长调节剂在种子休眠与萌发中的作用 252

第二节　植物生长调节剂在植物生长中的作用 254

第三节　植物生长调节剂在插条生根中的作用 255

第四节　植物生长调节剂在化学除草中的作用 257

第五节　植物生长调节剂在化学杀雄中的作用 257

第六节　植物生长调节剂在花期调控中的作用 257

第七节　植物生长调节剂在果实成熟中的作用 258

第八节　植物生长调节剂在鲜花保鲜中的作用 259

第九节　植物生长调节剂在植物性别调控中的作用 261

第十节　植物生长调节剂在果实催熟中的作用 262

第二节　植物细胞膜透性的测定 264

第一节　材料准备 264

第二十二章　植物的抗性生理机理研究 264

第三节　丙二醛和脯氨酸含量的测定 266

第二十三章　植物衰老的生理机理研究 267

第二十四章　超氧化物歧化酶的分离、纯化 269

第一节　超氧化物歧化酶的活性测定 269

第二节　动物血中超氧化物歧化酶的提取 271

第三节　离子交换法分离纯化超氧化物歧化酶 272

第四节　金属螯合色谱分离纯化超氧化物歧化酶 272

第三部分 研究性技术 277

第二十五章　植物气孔开闭机理研究技术 277

第二十六章　植物必需元素的验证 279

第二十七章　C3植物和C4植物的筛选 280

第二十八章 环境因子对植物光合速率的影响 282

第二十九章 延长果实贮藏保鲜时间的研究技术 284

第三十章　植物向性运动的研究技术 286

第三十一章　植物激素对植物生长发育的影响 287

第三十二章　植物细胞全能性的验证 288

第三十三章 林木种质保存和基因库的建设方案 289

第三十四章　植物组培苗培养及其产业化生产 290

第三十五章　植物抗旱机理研究技术 291

第三十六章　植物生长发育研究技术 292

第一节 植物光合、呼吸、蒸腾速率及气孔导度和内部CO2浓度的测定 292

第二节　植物叶片荧光测定 293

第三节　植物希尔反应和光合磷酸化测定 296

第四节　Rubisco功能与纯化 299

第五节　Rubisco定量分析——免疫扩散法 303

第三十七章　植物衰老机理研究技术 304

第一节　植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白的含量测定 304

第三节　抗坏血酸含量及抗坏血酸过氧化物酶活性的测定 305

第二节　植物组织中超氧物歧化酶（SOD）活性测定 305

第四节　植物组织中过氧化物酶活性的测定（比色法） 307

第五节　植物组织中过氧化氢酶活性的测定（比色法） 307

第六节　植物组织或器官中丙二醛（MDA）含量的测定 307

第三十八章　植物分子生物学研究技术 308

第一节　农杆菌介导的基因转化方法 308

第二节 利用RT-PCR方法克隆植物功能基因及基因测序 310

第三十九章　分子杂交技术 312

第一节　核酸探针标记的方法 312

第二节　几种常见的杂交 317

第三节　杂交反应的条件及参数的优化 321

第四部分 实验基本要求 325

第四十章 实验须知 325

第四十一章　数据处理 327

第四十二章　层析技术 330

第四十三章 电泳技术 336

第四十四章 常用仪器的使用方法 342

第一节 电导率仪的使用方法 342

第二节　分光光度计的使用方法 342

第三节　超净工作台的使用方法 349

第四节　高速冷冻离心机的使用方法 350

第五节　电泳仪的使用方法 351

第六节　阿贝折光仪的使用方法 353

第七节　核酸蛋白检测仪的使用方法 353

第八节　酶联免疫检测仪的使用方法 354

第四十五章 常用试剂的配制 355

第一节　玻璃仪器的洗涤 355

第二节　常用酶的配制 355

第三节　常用抗生素溶液的配制 356

第四节　常用杂交试验用封闭剂 357

第五节　常用贮存液的配制 358

附录 363

附录1　国际单位及其他 363

附录2　常用有机溶剂及其主要性质 365

附录3　常用贮存液的配制参数 366

附录4　常用酸碱的技术参数 369

附录5　常用凝胶的技术参数 370

附录6　氨基酸的特性 373

附录7　遗传密码 374

附录8　一些常用的缓冲溶液 375

附件9　常用培养基 381

附录10　常用酸碱指示剂的特性 382

附录11　常用组织培养药品 383

附录12　实验报告范文 384

主要参考书籍和文献 387