生物化学与分子生物学实验指导PDF电子书下载

第一篇 基础理论和技术第一章 离心技术 3

第一节 基本原理 3

第二节 离心机的种类和基本结构 5

第三节 常用离心技术 6

第四节 离心技术在生物学研究中的应用 9

第二章 分光光度法 11

第一节 基本原理 11

第二节 分光光度计 12

第三节 分光光度技术的应用 14

第三章 层析技术 17

第一节 层析基本理论 17

第二节 常用的层析技术 20

第四章 电泳技术 27

第一节 基本原理 27

第二节 电泳的分类 30

第三节 常用的电泳技术 31

第五章 生物化学实验样品制备技术 38

第一节 生物大分子制备的特点和一般步骤 38

第二节 植物样品的制备 39

第三节 动物样品的制备 41

第四节 微生物样品的制备 44

第五节 生物大分子——蛋白质 46

第六节 生物大分子——核酸 55

第六章 真核生物基因文库的构建 73

第一节 cDNA文库的概念 73

第二节 cDNA文库构建的策略 74

第三节 cDNA文库的筛选 80

第七章 核酸杂交技术 83

第一节 分子杂交的一般过程 83

第二节 分子杂交的种类 84

第三节 探针 85

第四节 印迹技术 90

第五节 杂交体系 92

第六节 杂交信号的检测方法 92

第八章 聚合酶链式反应 94

第一节 聚合酶链式反应的发展历史 94

第二节 PCR的原 95

第三节 PCR体系与条件 96

第四节 PCR循环参数的确定 98

第五节 PCR需注意的事项 99

第六节 PCR的种类及用途 100

第九章 基因工程 105

第一节 基因工程的基本概念 105

第二节 基因工程的发展历史 109

第三节 基因工程的研究意义 111

第四节 基因工程的基本内容 113

第十章 DNA序列测定技术 150

第一节 概述 150

第二节 Sanger双脱氧链终止法 150

第三节 Maxam-Gilbert DNA化学降解法 152

第四节 测序策略 154

第五节 DNA序列测定自动化 157

第十一章 生物芯片技术 159

第一节 生物芯片的概念 159

第二节 生物芯片技术的发展历史 159

第三节 生物芯片的分类及特点 160

第四节 常用生物芯片的应用 163

第二篇 生物化学实验第十二章 生物化学基础实验 171

实验一 缓冲溶液的配制和氨基酸两性性质的测定 171

实验二 分光光度计线性分辨范围的测定 176

实验三 还原糖和总糖含量的测定 178

实验四 用阳离子交换树脂摄取氯化钠 181

实验五 蛋白质的沉淀反应 183

实验六 定磷法测定RNA含量 185

实验七 紫外吸收法测定核酸的含量 187

实验八 可溶性糖的硅胶G薄层层析 189

实验九 血糖含量的测定 192

实验十 血清总胆固醇的测定 194

实验十一 血清甘油三酯的测定 196

实验十二 维生素C含量的测定（2,6-二氯酚靛酚法） 198

实验十三 氨基氮测定——甲醛滴定法 201

实验十四 酵母RNA的分离及组分鉴定 202

第十三章 生物化学综合实验 205

实验十五 双缩脲法测定蛋白质含量 205

实验十六 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 207

实验十七 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 209

实验十八 离子交换柱层析法分离氨基酸 212

实验十九 从牛奶中分离制备酪蛋白 213

实验二十 葡聚糖凝胶层析 215

实验二十一 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点 219

实验二十二 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 222

实验二十三 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白质 225

实验二十四 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量 230

实验二十五 蛋白质印迹（Western blot） 234

实验二十六 血清谷丙转氨酶活性的测定 237

实验二十七 酶的专一性 239

实验二十八 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 241

实验二十九 温度对酶活性的影响 243

实验三十 pH对酶活性的影响 246

实验三十一 底物浓度对酶促反应速度的影响——Km值的测定 249

实验三十二 绿豆超氧化物歧化酶的提取 252

实验三十三 硫酸铵沉淀法纯化SOD 253

实验三十四 葡聚糖凝胶层析脱盐 256

实验三十五 有机溶剂分级沉淀法纯化SOD 259

实验三十六 离子交换层析法纯化SOD 260

实验三十七 SOD活性的测定 263

实验三十八 绿豆SOD同工酶的鉴定 267

实验三十九 等电聚焦电泳法测定SOD的纯度及等电点 271

第三篇 分子生物学实验第十四章 分子生物学基础实验 277

实验四十 质粒DNA的提取及纯化 277

实验四十一 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳 281

实验四十二 DNA酶切与连接 288

实验四十三 DNA片段的回收 293

实验四十四 植物组织基因组DNA的提取 297

实验四十五 动物组织基因组DNA的提取 298

实验四十六 细菌基因组DNA的制备 300

实验四十七 大肠杆菌感受态细胞的制备 302

实验四十八 外源DNA的连接与转化 304

实验四十九 重组转化子的酶切鉴定 307

第十五章 分子生物学综合实验 310

实验五十 PCR扩增外源基因 310

实验五十一 Trizol法提取总RNA 315

实验五十二 RT-PCR 317

实验五十三 Southern杂交 321

实验五十 Northern杂交 326

实验五十五 外源基因的诱导表达与检测 332

实验五十六 大肠杆菌包涵体的纯化与变复性 335

实验五十七 RNAi抑制GFP基因的表达 338

实验五十八 寡聚核苷酸介导的克隆DNA的定点诱变 340

实验五十九 Real-time PCR检测基因的表达水平 346

实验六十 热休克蛋白启动子的活性检测 350

实验六十一 体外翻译和免疫沉淀 352

实验六十二 双向电泳分离蛋白 354

实验六十三 体外转录 364

实验六十四 稳定转化细胞系的筛选 366

实验六十五 向GenBank提交DNA序列 368

实验六十六 常用生物学软件的使用 370

第四篇 创新性实验一、创新实验操作流程 383

二、自主创新性实验参考题目 383

附录 385

一、实验室中常用酸碱（液体）的比重和浓度 385

二、常用缓冲液的配制 385

三、硫酸铵溶液饱和度计算表 390

四、常用核酸的长度与分子量 391

五、常用核酸蛋白换算数据 392

六、常用蛋白质分子量标准参照物 393

七、常用DNA分子量标准参照物 393

八、常用酶的配制 393

九、常用抗生素的配制 394

十、常用贮存液的配制 395

十一、遗传密码 400

十二、氨基酸的特性 401

十三、几种最常用的限制性核酸内切酶位点 402

十四、离心机转速与相对离心力的换算 403

十五、常用离子交换剂 404

十六、常用凝胶过滤层析介质 406

十七、常用分子生物学网址 408

十八、实验室规则 410

十九、实验记录与实验报告 410

参考文献 412