分子病理生物学实验技术指南PDF电子书下载
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- 作 者:朴英实,林贞花主编;尚永军,延光海等副主编
- 出 版 社:北京:人民军医出版社
- 出版年份:2015
- ISBN:9787509183458
- 页数:282 页
第1章 组织病理染色 1
第一节 苏木素-伊红染色 1
一、制作切片 2
二、HE染色 5
第二节 特殊染色 6
一、特殊染色的意义 7
二、常见的几种特殊染色 7
第三节 免疫组织化学染色 16
一、防脱片的制作 16
二、免疫组织化学染色 16
第2章 细胞实验 21
第一节 细胞培养基础 21
一、操作前准备 22
二、细胞复苏 22
三、细胞消化 23
四、细胞传代、接种 24
五、细胞冻存 24
六、细胞计数 25
七、原代细胞培养 27
八、常用细胞培养基及其配制方法 31
九、细胞污染及解救方法 34
第二节 细胞功能实验 36
一、肿瘤细胞生物学特性 36
二、体外培养细胞生物学检测方法 38
三、细胞增殖检测-MTT实验 40
四、细胞转染 42
五、划痕实验 47
六、集落(克隆)形成实验 48
七、迁移实验和侵袭实验 53
八、细胞内抗氧化活性测定 55
九、细胞凋亡和自噬检测 59
第三节 三维细胞培养 84
一、三维成球培养 85
二、三维胶原支架材料细胞培养 89
第3章 分子生物学实验 99
第一节 质粒制备、提取 99
一、操作前准备 99
二、菌落制备主要环节 100
三、质粒提取 101
四、培养基配方 103
第二节 分子提取方法 104
一、总RNA提取 105
二、DNA提取 111
三、蛋白提取 115
第三节 聚合酶链式反应 122
一、操作前准备 123
二、PCR仪反应参数的设定 123
三、反应体系的准备 124
四、PCR操作 126
五、PCR产物的分析方法 127
六、PCR产物电泳结果图异常及可能的原因 129
七、反转录PCR 130
八、实时荧光定量PCR 134
九、DNA的PCR扩增 139
第四节 DNA检测 140
一、DNA测序 140
二、单核苷酸多态性检测 147
三、甲基化特异性聚合酶链反应 149
第五节 蛋白质检测 152
一、酶联免疫吸附试验 152
二、蛋白印迹法 156
三、凝胶迁移或电泳迁移率实验 170
四、体外SUMO修饰实验 174
五、免疫共沉淀 178
六、免疫荧光染色及共聚焦显微镜观察 182
七、双荧光素酶报告基因检测 187
第六节 染色质免疫共沉淀 191
一、实验原理 191
二、实验注意点 192
三、基本流程 192
四、实验操作 193
第七节 流式细胞仪检测 195
一、流式细胞仪应用简介 196
二、细胞凋亡检测 197
三、细胞周期检测 199
四、DNA倍体检测 202
五、表面抗原检测 213
六、细胞因子检测 216
七、细胞分选 221
第八节 基因芯片扫描检测 225
一、实验前准备 226
二、总RNA提取、纯化及检测 226
三、反转录合成单链cDNA 227
四、Second strand cDAN合成 228
五、体外转录合成cRNA 229
六、aRNA纯化 230
七、aRNA质量检测 232
八、反转录 233
九、cDNA纯化 234
十、荧光标记 236
十一、芯片的挑选及预处理 237
十二、芯片杂交 238
十三、芯片清洗、扫描 240
第九节 微卫星不稳定性检测 242
一、试剂 243
二、DNA提取 244
三、DNA质检及保存 244
四、聚合酶链式反应(PCR) 244
五、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 244
六、银染 244
七、阳性判定标准 244
第4章 动物体内实验 249
第一节 实验动物的捉拿及处死方法 249
一、捉拿法 249
二、给药方法 250
三、处死方法 253
第二节 动物模型制备 254
一、实验动物的选择原则 254
二、常用实验动物的特点 254
三、小鼠炎症性肠病模型制备 254
四、过敏反应小鼠模型制备 257
五、小鼠体内荷瘤模型制备 259
附录A 英汉名词对照 264
彩图 275
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