蓝莓花青素拮抗化学性肝损伤及相关机制研究PDF电子书下载

摘要 1

1.引言 1

1.1 肝损伤的机制 1

1.1.1 肝细胞损伤的化学机制 1

1.1.2 肝细胞损伤的免疫学机制 2

1.2 化学性肝损伤模型 3

1.2.1 CCl4肝损伤模型 4

1.2.2 酒精性肝损伤模型 4

1.3 蓝莓活性成分及其在防治CC14肝损伤中潜在的作用 4

1.3.1 蓝莓及其花青素 4

1.3.2 花青素的主要成分及性质 5

1.3.3 花青素抗氧化活性功能研究进展 7

1.4 研究目的、意义及内容 8

1.4.1 研究的目的及意义 8

1.4.2 研究内容 8

1.4.3 创新之处 9

1.4.4 技术路线 10

2.蓝莓中花青素类物质的分离纯化研究 11

2.1 材料与方法 11

2.1.1 材料与试剂 11

2.1.2 实验仪器 12

2.1.3 实验方法 12

2.2 结果与分析 15

2.2.1 HPLC法测定纤维素酶提取的蓝莓花青素含量 15

2.2.2 树脂的筛选 18

2.2.3 AmberliteXAD-7大孔树脂的静态性能研究 19

2.2.4 XAD-7大孔树脂的动态性能研究 22

2.2.5 蓝莓花青素单体的结构分析 24

2.3 小结 32

3.蓝莓花青素体外清除自由基活性研究 33

3.1 材料与方法 33

3.1.1 材料与试剂 33

3.1.2 实验仪器 34

3.1.3 实验方法 34

3.2 结果与分析 35

3.2.1 总抗氧化能力 35

3.2.2 DPPH自由基清除能力 36

3.2.3 β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系的抑制作用 37

3.3 讨论 38

3.3.1 蓝莓花青素体外抗氧化作用 39

3.3.2 三种花青素单体抗氧化差异 39

3.4 小结 40

4.蓝莓花青素对CCI4诱导小鼠肝损伤的保护研究 41

4.1 材料和方法 41

4.1.1 材料与试剂 41

4.1.2 实验仪器 42

4.1.3 动物与分组 42

4.1.4 动物饲养及处理 42

4.1.5 检测指标及方法 43

4.1.6 数据处理和统计分析 44

4.2 结果与分析 45

4.2.1 肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数的检测 45

4.2.2 蓝莓花青素对小鼠血清氧化应激水平的影响 45

4.2.3 蓝莓花青素对小鼠肝组织形态学变化的影响 46

4.2.4 蓝莓花青素对小鼠肝组织氧化应激水平的影响 48

4.3 讨论 48

4.3.1 蓝莓花青素对小鼠血清肝酶水平和肝组织病理形态学的影响 49

4.3.2 蓝莓花青素对小鼠氧化应激水平的影响 49

4.4 小结 50

5.蓝莓花青素对CCI4损伤L-02肝细胞的保护研究 51

5.1 材料与方法 51

5.1.1 材料与试剂 51

5.1.2 实验仪器 52

5.2 试验方法 53

5.2.1 主要试剂的配制 53

5.2.2 细胞传代培养 56

5.2.3 细胞的冻存与复苏 56

5.2.4 细胞的增殖抑制实验 56

5.2.5 细胞凋亡的检测方法 58

5.2.6 SDS-PAGE与Westernblotting 60

5.2.7 数据处理和统计分析 62

5.3 结果与分析 63

5.3.1 CC14作用不同浓度、时间对细胞L-02存活率的影响 63

5.3.2 蓝莓花青素对CC14损伤L-02细胞的保护及氧化应激影响 63

5.3.3 花青素单体对CCl4损伤L-02细胞的保护及氧化应激影响 64

5.3.4 三种单体对肝损伤细胞的保护和抗氧化作用比较 68

5.3.5 矢车菊素-3-葡萄糖苷对CCl4损伤L-02细胞克隆形成的影响 71

5.3.6 PI单染色检测亚二倍体百分率及细胞周期改变 72

5.3.7 AnnexinV-FITC/PI双染色检测细胞凋亡 74

5.3.8 矢车菊素-3-葡萄糖苷对L-02细胞中Caspase-3蛋白含量的影响 76

5.4 讨论 77

5.4.1 肝细胞CCl4损伤模型的建立 77

5.4.2 蓝莓花青素对肝细胞存活率的提高作用 77

5.4.3 蓝莓花青素对肝细胞抗氧化防御系统的影响 78

5.4.4 矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制正常细胞因损伤而坏死的机理研究 80

5.5 小结 82

6.微乳化提高蓝莓花青素稳定性研究 83

6.1 材料与方法 83

6.1.1 材料与试剂 83

6.1.2 实验仪器 85

6.2 实验方法 86

6.2.1 伪三元相图法制备微乳 86

6.2.2 空白微乳各相的筛选 86

6.2.3 微乳的鉴定 87

6.2.4 微乳理化指标的测定 87

6.2.5 花青素微乳的制备及表征 88

6.2.6 微乳包埋前后花青素的稳定性 88

6.2.7 微乳包埋前后花青素的体外抗氧化活性 88

6.2.8 数据处理 89

6.3 结果与分析 90

6.3.1 空白微乳的制备 90

6.3.2 蓝莓花青素微乳制备及表观形态 97

6.3.3 蓝莓花青素微乳包埋前后的稳定性研究 98

6.3.4 蓝莓花青素微乳包埋前后的抗氧化活性研究 99

6.4 讨论 103

6.5 小结 104

7.结论与展望 106

7.1 结论 106

7.2 展望 107

参考文献 109