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前言 1

第一章 抗原抗体反应总论 1

第一节 抗原抗体的一般特点 1

一、抗原的特点和种类 1

二、抗原的决定基和结合价 2

三、抗原的理化性状及特异性基础 4

四、抗体的基本结构和种类 5

五、抗体结合价的物理化学性状 8

六、抗体的亲和力和活动性 9

一、抗原抗体的胶体特性及极化基吸附作用 10

第二节 抗原与抗体结合的机理 10

二、抗原与抗体结合的力学性质 12

第三节 抗原抗体反应的形式 14

一、单纯的抗原抗体反应 14

二、抗抗体或双抗体反应 15

第四节 抗原抗体反应特点 16

第五节 影响抗原抗体结合的因素 17

第二章 蛋白质的盐析技术 18

第一节 蛋白质的几个性质 18

一、蛋白质的两性游离及等电点 18

二、蛋白质的胶体性质 19

一、中性盐类 20

三、蛋白质的沉淀作用 20

第二节 影响中性盐分离和提纯蛋白质的几个因素 20

二、离子强度 21

三、溶液的pH值 23

四、蛋白质的浓度 23

五、温度 23

第三节 利用中性盐分离血浆的主要成分 23

第四节 去盐及浓缩 25

一、去盐 26

二、蛋白质的浓缩方法 26

第一节 凝胶的性质和应用原理 28

第三章 凝胶过滤 28

第二节 洗脱特性 30

第三节 几种常用凝胶的使用 32

一、葡聚糖凝胶 32

二、亲脂性葡聚糖凝胶 37

三、聚丙烯酰胺凝胶 37

四、琼脂糖凝胶 38

第四节 凝胶过滤在免疫学上的应用 38

一、制备上的应用 38

二、分析上的应用 41

第一节 离子交换原理 42

第四章 离子交换层析法 42

第二节 离子交换剂种类和性质 44

一、离子交换纤维素 44

二、离子交换葡聚糖凝胶 45

第三节 初试条件的选择 46

一、离子交换剂的选择 46

二、粒度大小的选择 47

三、缓冲液的选择 47

第四节 操作步骤 47

一、离子交换纤维素的处理 47

二、加样 48

二、装柱 48

四、洗脱 49

五、洗脱液的检查分析 50

第五章 亲和层析技术 52

第一节 亲和层析的基本原理 53

第二节 几种类型的免疫吸附剂及其应用方法 53

一、使抗原或抗体吸附在某些固体支持物的表面上 53

二、网络法 53

三、共价键结合法 54

四、戊二醛偶联吸附柱的制备法 57

一、琼脂糖珠(Sepharose 4B)制备法 58

第三节 亲和层析在免疫学中的应用 58

第四节 Sepharose 4B和CNBr的制备法 58

二、溴化氰(CNBr)的合成法 59

第六章 免疫球蛋白的纯化和测定 61

第一节 免疫球蛋白的分离 61

一、IgG的纯化方法 61

二、IgM的纯化方法 63

三、IgA的纯化方法 63

四、IgD的分离和纯化 64

五、IgE的分离和纯化 65

二、圆盘电泳法 67

三、免疫电泳法 67

第二节 免疫球蛋白的纯度的鉴定 67

一、双向扩散法 67

第三节 抗免疫球蛋白免疫血清的制备 68

一、单价免疫血清的制备 68

二、动物放血法 69

三、抗血清的鉴定和处理 69

第四节 免疫球蛋白的实际测定 70

一、免疫单扩散免疫球蛋白定量法 70

一、免疫球蛋白增殖病 72

第五节 免疫球蛋白测定在临床上的应用 72

二、火箭免疫电泳法免疫球蛋白定量(见第七章) 72

二、免疫缺陷病 76

附：正常血浆蛋白成分特征表 77

第七章 免疫扩散和免疫电泳方法 79

第一节 琼脂免疫扩散法 79

一、试验材料 80

二、试验方法 80

三、影响因素 83

一、什么是电泳和电泳技术 84

二、电泳技术的基本原理 84

第二节 区带电泳技术 84

三、区带电泳简要介绍 87

第三节 对流免疫电泳技术 88

一、对流电泳的基本原理 89

二、操作方法 91

三、有关几个问题 91

第四节 琼脂免疫电泳技术 92

一、免疫电泳的简单原理 92

二、材料和试剂 93

三、操作方法 95

四、琼脂干燥薄膜的作法 95

1.免疫电泳常见的沉淀线 96

五、免疫电泳结果分析 96

2.正常人血浆蛋白免疫电泳分析 97

3.异常人血浆蛋白免疫电泳分析 100

4.免疫电泳综合分析 104

第五节 火箭免疫电泳 106

一、材料 106

二、方法 106

三、几点注意 107

四、火箭电泳的改良方法(IgC火箭电泳) 107

二、方法 108

一、材料 108

第六节 交叉免疫电泳 108

三、应用 109

四、鉴定和计算 110

第七节 纵列交叉比较免疫电泳 110

第八节 圆盘电泳 111

一、原理 111

二、器材 111

三、圆盘电泳的简化操作方法 112

四、几种原料的纯化和制备 113

五、圆盘电泳的应用 113

第九节 等电聚焦电泳 114

二、仪器和设备 115

三、凝胶板的制备 115

四、电泳 115

一、材料 115

五、固定染色 116

六、pH的测定及PI的确定 116

第十节 粉末电泳(淀粉块电泳) 116

附表：人血浆蛋白免疫电泳组分说明 118

第八章 补体技术 123

第一节 补体的化学性质 123

二、方法 125

第二节 补体结合试验 125

一、材料 125

第三节 免疫粘连血凝试验 128

一、试剂 128

二、试验方法 129

第四节 溶血空斑试验 130

第五节 总补体活性测定(CH50测定) 131

一、试剂 131

二、试验方法 131

三、计算 132

二、人C3的提取和测定方法 133

第六节 单个补体成分的纯化方法 133

一、人C1q纯化方法(见自身免疫病，免疫复合物节) 133

三、人C4成分的提取和测定方法 136

四、C2的提取和纯化方法 138

第七节 补体测定的临床意义 140

第九章 间接血凝试验 143

一、基本原理 143

二、试剂的制备 145

三、致敏方法和实际试验 146

四、影响鞣酸化血球的因素 147

五、间接血凝的临床应用 149

一、直接萤光抗体法 151

第十章 免疫萤光技术 151

第一节 免疫萤光的原理和方法 151

二、间接萤光抗体法 152

三、补体萤光抗体法 153

第二节 萤光显微镜术 153

一、萤光现象 155

二、萤光素类 155

三、萤光显微镜使用的一些问题 157

第三节 萤光标记抗体的制备 157

二、免疫方法 158

三、抗体的提纯 158

一、抗原的制备 158

四、抗体的标记 159

五、标记抗体的提纯 160

六、标记抗体的鉴定 161

第四节 免疫萤光的应用 162

一、在细菌学上的应用 162

二、在寄生虫学中的应用 162

三、在病毒学上的应用 162

四、在免疫病理方面的应用 162

五、在自身免疫病中的应用 162

二、双抗体法或者架桥法(Bridge) 165

三、竞争性抑制法 165

第一节 ELISA的应用原理 165

一、间接法 165

第十一章 酶连免疫吸附技术(ELISA) 165

第二节 酶纯化的方法和活性测定 167

一、辣根过氧化物酶的纯化方法 167

二、辣根过氧化物酶的纯度和活性测定 167

第三节 酶标记抗体的制备法 167

一、戊二醛一步法 168

二、戊二醛二步法 168

三、过碘酸钠结合法 168

二、双抗体法查肾组织的沉淀抗体 169

第四节 酶连免疫吸附测定方法 169

一、间接过氧化酶标记法查抗核抗体 169

三、固相免疫酶测定法 170

第五节 ELISA的临床应用 172

第十二章 放射免疫技术 173

第一节 放射免疫的基本原理 173

第二节 抗原的同位素标记 174

第三节 放射免疫测定法 176

一、抗血清稀释度的选择 177

二、分离技术的选择 177

三、标准竞争抑制曲线 178

第四节 免疫沉淀放射自显影 179

四、血清样品的测定 179

第五节 放射免疫的临床应用 180

一、AFP放射免疫测定 181

二、绒毛膜促性腺激素的放射免疫测定 182

三、甲状腺激素的放射免疫测定 182

四、促甲状腺素的放射免疫测定 183

五、毛地黄的放射免疫的测定 183

六、其他应用 183

第十三章 细胞免疫技术 185

一、皮肤试验 186

第一节 体内淋巴细胞功能试验 186

二、其他方法 187

第二节 淋巴细胞分离方法和活性测定 188

一、直接沉降法 188

二，比重分层法 188

三、淋巴细胞活力试验 189

第三节 玫瑰花形成试验 190

一、E-玫瑰花形成试验(T细胞) 190

二、微量全血测定E-玫瑰花方法(T细胞) 191

三、活性E-玫瑰花形成试验(T细胞) 191

四、EAC玫瑰花形成试验(B细胞) 193

七、稳定玫瑰花形成试验(T细胞) 194

五、FBC花环形成试验(B细胞) 194

六、混合玫瑰花形成试验 194

八、B淋巴细胞表面膜免疫球蛋白萤光标记 195

九、鼠玫瑰花形成试验(B细胞) 195

第四节 淋巴细胞转化试验 196

一、形态学方法 196

二、全血培养法 197

三、培养法 197

四、3H同位素掺入转化法 197

附：PHA提取法 197

一、各种细胞的制备 199

第五节 巨噬细胞移动抑制试验 199

三、琼脂糖平皿打孔法 200

四、琼脂糖悬滴培养法(Hairng Ton改良法) 200

二、毛细管测定法 200

第六节 巨噬细胞电泳 201

第七节 白细胞粘附抑制试验 202

第八节 巨噬细胞吞噬功能测定法 204

第九节 NBT(硝基四氮唑兰)试验 205

第十节 间接嗜碱性细胞脱颗粒试验 206

第十四章 自身免疫病免疫检查方法和临床价值 208

第一节 概论 208

一、类风湿因子乳胶凝集试验 211

第二节 类风湿因子 211

二、致敏羊血球凝集试验(Waaler-Rose)试验 212

三、致敏乳胶凝集试验 213

第三节 抗核抗体的检测方法 215

一、肝片间接免疫萤光检测抗核抗体 215

二、人末梢血片萤光抗体法检测抗核抗体 218

三、DNA斑片试验 219

四、DNA间接血凝试验 220

第四节 抗平滑肌抗体和抗线粒体抗体的荧光抗体检查法 222

二、琼脂双向扩散法测定抗甲状腺抗体 224

第五节 抗甲状腺球蛋白抗体的检测 224

一、甲状腺球蛋白的制备 224

三、间接血凝试验测定抗甲状腺球蛋白抗体 225

四、萤光抗体法检查抗甲状腺抗体 226

第六节 抗心肌抗体的检测 227

第七节 抗胃壁细胞抗体的检查 228

第八节 自身抗体免疫萤光联合筛选法 229

第十五章 体液中免疫复合物检测方法 232

第一节 Clq凝胶扩散法和Clq放射免疫法测定免疫复合物 233

一、DNA沉淀法提取Clq 233

二、螯合沉淀法提取Clq 234

三、Clq沉淀免疫复合物操作方法(琼脂扩散法) 235

四、Clq放射免疫标记测定免疫复合物方法 235

第二节 mRF凝胶扩散法测定免疫复合物 236

第三节 固相胶固素结合法测定免疫复合物 237

一、牛胶固素的提取法 237

二、固相放射免疫测定免疫复合物 238

第四节 抗补体测定(微量法)检测免疫复合物 238

第五节 聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物 240

第六节 活检组织中免疫复合物萤光抗体检查 241

第七节 免疫复合物检测的临床意义 242

第一节 免疫血液病的基本概念 244

第十六章 免疫血液病的发生机理和检验诊断概要 244

第二节 红血球系免疫病发生机理和检查 245

一、自身免疫性溶血性贫血 245

二、药物过敏性溶血性贫血 248

三、恶性贫血 250

四、输血反应 253

第三节 白细胞系免疫病的发生机理和检查 256

一、免疫性中性粒细胞减少症 256

二、白细胞的输血反应 260

三、嗜酸性白细胞增多症 260

一、血小板功能及血小板免疫病种类 261

第四节 血小板系免疫病的发生机理和检查 261

二、特发性血小板减少性紫癜 262

三、药物过敏性血小板减少性紫癜 266

四、输血后紫癜及同种免疫新生儿血小板减少症 268

第五节 血浆异型蛋白所致的免疫反应 269

一、输血中血浆蛋白的过敏反应 269

二、免疫性抗凝因子所致的血凝障碍 270

第十七章 移植免疫实验室检查技术 273

一、微量淋巴细胞毒配型技术 273

二、血小板补体结合微量试验 275

三、混合淋巴细胞培养方法(微量法) 276

四、交叉配合试验 279

五、淋巴细胞转化(四小时氚标测定) 281

六、玫瑰花形成试验和玫瑰花形成抑制试验 282

七、白细胞移动抑制试验 283

八、淋巴细胞简单冰凉保存法 284

第十八章 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的纯化与反相血凝测定法 285

第一节 HBsAg的纯化 285

一、盐析与加热变性法纯化HBsAg 285

二、Rivanol(利凡诺)合并(NH4)2SO4纯化HBsAg 285

三、有机溶剂沉淀法纯化HBsAg 286

六、亲和层析法纯化HBsAg 287

五、抗原抗体复合物及凝胶过滤法纯化HBsAg 287

四、聚乙二醇-胃蛋白酶-Tween80纯化HBsAg 287

第二节 反相被动血凝检测乙型肝炎表面抗原 289

第三节 乙型肝炎免疫研究和临床价值 291

一、乙型肝炎和体液免疫 291

二、乙型肝炎和细胞免疫 293

三、E抗原和E抗体 293

第十九章 免疫学诊断在临床上的应用 295

第一节 免疫学诊断的含义和范围 295

一、免疫学诊断的方法学 295

二、三级功能试验 296

三、细胞免疫的测定 297

二、体液免疫的测定 297

第二节 免疫学诊断的临床应用 297

一、非特异性免疫功能试验 297

四、变态反应疾患的免疫学诊断 298

五、自身免疫病的免疫学检查 299

六、传染病的免疫学诊断 300

七、肿瘤的免疫学诊断 300

第三节 结语 301

第二十章 抗血清的制备方法 302

一、动物的选择 302

二、免疫原 302

四、免疫和采血方法 303

三、佐剂的使用 303

五、抗血清效价测定和浓缩方法 306

六、抗血清的保存 307

附录一 免疫学技术常用试剂的配制 308

附录二 相对离心力(G)换算尺 328

附录三 希腊字母表 329

附录四 常量、微量、超微量度、量、衡单位名称表 330

附录五 常用免疫学术语解释 332

主要参考文献 361

编后记 367