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第一章 高效液相色谱用于生物样品的分离分析 1

1.1 液相色谱分离生物样品的基本原理和特征 1

1.1.1 生物样品的基本特性 2

1.1.2 生物样品的处理方法 3

1.1.3 生物样品分离对固定相的要求 4

1.1.4 生物样品的检测 7

1.2 生化样品分析常用的HPLC模式 7

1.2.1 反相色谱法 8

1.2.2 离子交换和离子色谱法 9

1.2.3 离子对色谱法 10

1.2.4 体积排除色谱法 10

1.2.5 疏水作用色谱 12

1.2.6 亲合色谱法 12

1.3 氨基酸、肽和蛋白质的分离分析 15

1.3.1 氨基酸分析 16

1.3.2 肽和蛋白质的分离分析 18

1.4 核酸及DNA分离 24

1.4.1 碱基、核苷、核苷酸和核酸的分析 25

1.4.2 DNA的分离分析 26

1.5 糖类及其有关化合物 28

1.6 生物样品的HPLC分析新技术 32

1.6.1 二维液相分离 32

1.6.2 快速分离技术 35

参考文献 37

第二章 生物样品的离子和离子交换色谱的分离分析 39

2.1 离子交换色谱和离子色谱的特点及应用 39

2.2 离子交换色谱 40

2.2.1 离子交换色谱分离机理与影响因素 40

2.2.2 色谱固定相 45

2.2.3 色谱流动相 48

2.2.4 分离条件选择 48

2.2.5 离子交换色谱在生物样品分析中的应用 51

2.3 离子色谱 72

2.3.1 离子色谱分离机理 72

2.3.2 离子色谱常用检测器 73

2.3.3 离子色谱在生化分析中的应用 74

参考文献 77

第三章 液相制备色谱与模拟移动床技术 82

3.1 液相制备色谱技术 82

3.1.1 液相制备色谱填料 83

3.1.2 液相制备色谱柱技术 85

3.1.3 进样和进样分布 86

3.1.4 液相制备色谱的检测和操作自动化 87

3.1.5 液相制备色谱的工艺流程 87

3.2 模拟移动床色谱及其在手性药物大规模拆分中的应用 90

3.2.1 模拟移动床色谱的分离原理 91

3.2.2 模拟移动床色谱的仪器装置 93

3.2.3 操作参数的确定 94

3.2.4 应用实例 96

3.3 双柱切换制备系统及其在手性样品分离中的应用 97

3.3.1 双柱切换制备系统的分离原理 97

3.3.2 双柱切换制备系统的工艺流程 99

3.3.3 应用双柱切换制备系统分离手性样品 100

3.4 径向色谱在生物样品分离中的应用 102

参考文献 107

第四章 生物样品的超临界流体色谱分离分析 110

4.1 超临界流体色谱的基本原理 110

4.1.1 超临界现象和超临界流体的特征 110

4.1.2 超临界流体色谱的特点 112

4.1.3 流动相及改性剂 114

4.1.4 色谱柱和固定相 117

4.2 超临界流体色谱仪器 119

4.2.1 SFC的一般流程 119

4.2.2 SFC流动相输送系统 120

4.2.3 SFC分离系统 121

4.2.4 SFC检测系统 122

4.3 SFC联用技术 122

4.3.1 SFC-MS联用 122

4.3.2 SFC-FTIR联用 125

4.3.3 SFC-NMR联用 127

4.4 超临界流体色谱的应用 128

4.4.1 糖类 128

4.4.2 脂肪酸和酯类 129

4.4.3 甘油酯 132

4.4.4 甾类化合物 133

4.4.5 维生素 134

4.4.6 氨基酸、肽、蛋白质 136

4.4.7 药物 138

4.4.8 手性对映体 141

4.4.9 展望 145

参考文献 145

第五章 双向电泳在细胞蛋白质分离中的应用 148

5.1 概述 148

5.2 一向等电聚焦（IEF）电泳 150

5.2.1 IEF凝胶制备 151

5.2.2 样品制备与加样 152

5.2.3 运行 154

5.2.4 IPG胶条的平衡 155

5.3 二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 156

5.4 胶上蛋白的检测 157

5.4.1 考马斯亮蓝染色 158

5.4.2 银染 159

5.4.3 负染 162

5.4.4 荧光染色 162

5.5 存在问题 163

5.6 双向电泳技术的改进 163

5.6.1 三步提取法 163

5.6.2 亚细胞器分离 164

5.6.3 窄范围pH胶条的使用 164

5.6.4 胶上差示电泳DIGE技术 165

5.6.5 虚拟双向技术 166

5.7 展望 167

参考文献 167

第六章 毛细管电泳在生物样品分析中的应用 169

6.1 毛细管电泳原理与装置 169

6.1.1 基本原理 169

6.1.2 毛细管电泳仪器系统 175

6.2 毛细管电泳在氨基酸、肽及蛋白质分析中的应用 178

6.2.1 氨基酸分析 178

6.2.2 肽的分析 181

6.2.3 蛋白的CE分析 182

6.3 DNA与核苷分析 188

6.3.1 核苷酸分析 188

6.3.2 寡聚核苷酸与单链DNA（ssDNA）片段分离 189

6.3.3 双链DNA分离 190

6.3.4 大片段DNA（＞2kbp）分离 193

6.3.5 DNA测序 193

6.3.6 毛细管电泳DNA片段多态性分析 195

6.4 糖类样品的毛细管电泳分析 198

6.4.1 糖的毛细管电泳分离 198

6.4.2 糖的检测方法 203

6.5 毛细管电泳手性分离 208

6.5.1 毛细管电泳手性分离原理 208

6.5.2 手性分离条件的选择 209

6.5.3 手性毛细管电泳的应用与发展动向 214

6.6 多维毛细管电泳分离 218

6.6.1 矩形通道晶片平面二维电泳 219

6.6.2 柱切换二维毛细管电泳分离 221

6.6.3 多维立体毛细管电泳分离模式的构想 224

参考文献 230

第七章 毛细管电色谱及其在生物样品中的应用 236

7.1 毛细管电色谱简介 236

7.1.1 毛细管电色谱的历史 238

7.1.2 毛细管电色谱的特点 238

7.1.3 毛细管电色谱的分类 239

7.1.4 展望 239

7.2 毛细管电色谱仪器 240

7.2.1 进样系统 241

7.2.2 毛细管电色谱柱分离系统 241

7.2.3 检测系统 243

7.3 毛细管电色谱在氨基酸分离分析中的应用 244

7.4 毛细管电色谱在肽和蛋白质分离分析中的应用 248

7.5 毛细管电色谱在糖类分离分析中的应用 252

参考文献 255

第八章 微流控芯片在生物样品分离分析中的应用 261

8.1 微流控芯片的制备 261

8.1.1 照相平板印刷方法制备玻璃芯片 262

8.1.2 聚合物芯片的制备方法 263

8.2 毛细管电泳芯片 266

8.2.1 毛细管电泳芯片的构型 266

8.2.2 进样和流体控制 268

8.2.3 检测系统 269

8.2.4 CAE芯片 271

8.2.5 毛细管电泳芯片的集成系统 273

8.2.6 毛细管电泳芯片的应用 275

8.3 毛细管电色谱芯片 277

8.4 其他类型的微流控芯片 279

8.4.1 流体控制系统的微型化 279

8.4.2 样品固相萃取的微型化 279

8.4.3 PCR芯片 280

8.4.4 分析芯片 281

8.5 结束语 282

参考文献 282