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第1部分 显微镜技术 1

1.1 光学显微镜技术 1

1.1.1 普通光学显微镜的构造原理及使用方法 1

1.1.2 特殊显微镜的原理和使用 7

1.1.3 激光扫描共聚焦显微镜技术 13

1.1.4 光学显微标本的制作技术 18

1.2 电子显微镜技术 26

1.2.1 透射电子显微镜 26

1.2.2 透射电子显微镜样品制备 29

1.2.3 扫描电子显微镜 35

1.2.4 扫描电子显微镜样品制备 39

第2部分 细胞亚显微结构的分离和观察 44

2.1 细胞形态结构及显微测量 44

2.2 线粒体和液泡系的活体染色 45

2.3 细胞器的分级分离 48

2.4 细胞器的连续密度梯度离心制备与观察 49

2.5 植物细胞骨架的光学显微镜观察 52

2.6 动物细胞骨架的间接免疫荧光显示 54

2.7 细胞骨架的考马斯亮蓝法观察 55

第3部分 细胞生理学技术 58

3.1 细胞膜的通透性 58

3.2 细胞凝集反应 60

3.3 用荧光脂质进行细胞活体染色 61

3.4 台盼蓝染色法鉴定细胞生死状态 63

3.5 小鼠巨噬细胞吞噬的观察 65

3.6 胞饮作用 68

3.7 细胞膜钠通道的膜片钳记录 69

3.8 细胞计数 74

第4部分 细胞结构与化学成分的检测技术 77

4.1 DNA的细胞化学——Feulgen反应 77

4.2 RNA的细胞化学——Brachet反应 79

4.3 细胞多糖的PAS反应 80

4.4 细胞中过氧化物酶的显示方法 82

4.5 细胞中酸性磷酸酶的显示方法 84

4.6 细胞中碱性磷酸酶的定位 86

4.7 细胞膜蛋白、细胞浆蛋白和细胞核蛋白及总蛋白的提取 88

4.8 蛋白质的亚细胞定位（GFP报告基因融合法） 93

4.8.1 某动物基因编码蛋白的细胞定位实验 94

4.8.2 某植物基因编码蛋白的细胞定位实验 95

4.9 植物细胞中碱性蛋白与总蛋白的定位与观察 97

第5部分 细胞培养与细胞工程技术 99

5.1 植物原生质体的分离、培养与融合 99

5.2 胎鼠肝细胞的原代培养 101

5.3 神经胶质细胞的培养 105

5.4 胎鼠肝细胞的传代培养 107

5.5 细胞融合 109

5.6 细胞的冻存与复苏 111

5.7 细胞转染 113

第6部分 染色体的观察 117

6.1 Feulgen染色观察有丝分裂 117

6.2 青蛙骨髓细胞染色体标本的制备与观察 119

6.3 人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备 121

6.4 人类染色体G带显带技术 125

6.5 染色体核仁组织区的显示 126

第7部分 细胞重大生命活动的研究 128

7.1 细胞生长、细胞分裂与细胞周期 128

7.1.1 细胞毒和细胞活力测定 128

7.1.2 小鼠M期染色体的制备与观察 133

7.1.3 动物细胞中早熟染色体凝集的诱导和观察 135

7.1.4 细胞同步化 137

7.1.5 细胞周期的流式细胞仪检测 140

7.2 细胞分化 142

7.2.1 植物细胞的脱分化与再分化 142

7.2.2 血细胞的分化和不同类型血细胞的观察 144

7.3 细胞凋亡 147

7.3.1 细胞凋亡的形态学观察 147

7.3.2 细胞凋亡的DNA ladder检测 150

7.3.3 细胞凋亡的流式细胞仪检测 152

7.3.4 线粒体膜电位检测细胞凋亡 154

附录 157

附录A 常用染料及染色剂配制 157

附录B 常用细胞固定液 165

附录C 封片剂和粘贴剂 170

附录D 常用缓冲液的配制 171

附录E 常用培养基的配制 179

附录F 器械的清洗与消毒 187

附录G 光学仪器的保养与清洁 189

附录H 常用的单位换算 191

附录1 实验室常用技术参数 192

附录J 常用实验动物的血液生理生化 195

参考文献 204