临床医学实验方法学PDF电子书下载

第一部分 临床实验研究方法 3

第一篇 整体机能与器官功能检测方法 3

第一章 动物模型的建立与功能检测方法 3

第一节 全胚胎培养模型 3

第二节 缺血－再灌注损伤模型 4

第三节 脑卒中动物模型 9

第六节 糖尿病模型的制作 （1 9

第四节 心衰模型 11

第五节 胃癌动物模型 15

第七节 癫癎动物模型 22

第八节 肝损伤模型 24

第九节 动脉粥样硬化模型 29

第十节 速发型过敏性哮喘模型 30

第十一节 急性胰腺炎动物模型 31

第十二节 急性化脓性胆管炎动物模型 33

第十三节 人肝癌组织裸鼠模型的复制及实验室应用 34

第十四节 器官移植模型 36

第二章 器官模型的建立和功能检测方法 55

第一节 离体器官的灌注方法 55

第二节 微透析技术与离体组织条方法 60

第三章 微循环实验方法 65

第一节 微循环实验方法概论 65

第二节 脏器微循环观测 70

第二篇 形态学方法 79

第四章 各种电镜及光、电镜免疫双标、三标方法 79

第一节 电镜标本的制作方法 79

第二节 铸型扫描技术 81

第三节 电子显微镜水平的低温技术 83

第四节 双重和多重免疫标记 87

第五节 光镜三标和电镜三重显示技术 95

第五章 逆行追踪及免疫细胞化学方法 98

第一节 辣根过氧化物酶法 98

第二节 荧光素逆行标记法 99

第三节 免疫荧光法 100

第四节 酶标记抗体法 101

第五节 非标记抗体过氧化物酶－抗过氧化物酶法（PAP法） 102

第六节 抗生物素蛋白－生物素－过氧化物酶复合体法（ABC法） 104

第七节 HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法（PAP法） 106

第八节 荧光素逆行标记与免疫荧光结合法 107

第六章 形态测量学方法 109

第一节 目镜测微器定量分析 109

第二节 定量分析的影响因素 116

第三节 计算机图像分析和三维结构重建 119

第七章 原位分子杂交及应用 122

第一节 原位分子杂交组织化学技术基本原则 122

第二节 原位杂交探针制备和标记 125

第三节 常见原位杂交方法 133

第八章 其他方法 142

第一节 苏木精－伊红染色的应用和局限性 142

第二节 固定液的选择及要点 144

第三节 特殊细胞的形态学鉴定方法 147

第四节 免疫组织化学染色操作的注意事项、对照设计及结果判断 150

第三篇 细胞功能检测方法… 155

第九章 普通细胞培养方法 155

第一节 培养室仪器设备及试剂 155

第二节 原代分离细胞培养 157

第三节 细胞克隆化 159

第四节 组织块培养 161

第五节 器官培养 162

第六节 体内细胞培养及细胞培养新技术 163

第七节 细胞培养中饲（滋）养细胞的制备及成纤维细胞的去除 165

第八节 细胞培养中污染检测和排除 165

第九节 培养细胞的观察 167

第十节 培养细胞的冻存、复苏与运输 172

第十章 特殊细胞培养方法及细胞培养方法的应用 173

第一节 神经细胞培养方法 173

第二节 肝细胞、库普弗和伊藤痣细胞的分离与培养 175

第三节 血管平滑肌细胞的分离与培养 178

第四节 内皮细胞的分离和培养 180

第五节 特殊免疫细胞的培养 181

第六节 脂肪细胞培养 184

第七节 中国地鼠卵巢细胞和巨噬细胞的培养 185

第八节 肿瘤细胞培养 186

第九节 细胞培养在B淋巴细胞杂交瘤技术中的应用 187

第十节 无血清培养细胞的应用 190

第十一节 细胞培养在细胞转化及癌基因研究中的应用 192

第十二节 肝炎病毒细胞模型 196

第十一章 信号传递与细胞通讯… 199

第一节 细胞间缝隙连接通讯的检测 199

第二节 细胞膜受体的分离与纯化 202

第三节 第二信使系统 207

第十二章 电生理学方法在细胞通讯研究中的应用 220

第一节 可兴奋细胞动作电位的记录方法 220

第二节 双微电极电压钳技术 229

第三节 膜片钳技术 231

第四节 各种诱发电位的检测 239

第五节 其他方法 255

第十三章 细胞膜的制备与功能检测方法 267

第一节 细胞膜的制备 267

第四篇 亚细胞结构及功能检测方法 267

第二节 细胞膜功能的测定 271

第十四章 线粒体的制备和应用… 280

第一节 线粒体的制备 280

第二节 线粒体功能特征的检测 283

第三节 线粒体功能检测的应用 288

第十五章 微粒体的制备及微粒体酶系的测定 290

第一节 微粒体的制备 291

第二节 Cyt.P-450的多样性和MFOs的纯化与重组 292

第三节 微粒体混合功能氧化酶系活性的测定 292

第四节 诱导肝微粒体混合功能氧化酶的动物模型 296

第五节 溶酶体和过氧化氢酶体的制备和应用 297

第一节 肾和小肠质膜的分离制备 301

第十六章 肾脏与小肠质膜的制备及应用 301

第二节 制备物的性质鉴定 303

第五篇 医学化学分析方法… 307

第十七章 脂质和生物膜中脂质过氧化反应产物的检测……… 307

第一节 检测氧自由基实验方法 307

第二节 脂质过氧化降解产物的测定 312

第三节 不饱和脂肪酸测定法 316

第十八章 大型分析仪器在医学研究中的应用 318

第一节 离心分离技术 318

第二节 色谱分析 322

第三节 光谱分析 333

第四节 电化学检测 346

第十九章 流式细胞术 350

第一节 基本原理 350

第二节 流式细胞常用荧光染料 351

第三节 制备单细胞悬液技术 352

第四节 细胞的荧光标记 354

第五节 流式细胞术的数据分析 356

第六节 应用流式细胞术检测凋亡细胞的方法 359

第六篇 蛋白质与细胞因子的功能检测 362

第二十章 蛋白质的分离与纯化… 362

第一节 生物材料的前处理及蛋白质抽提 362

第二节 蛋白质的初步纯化 363

第三节 蛋白质的进一步纯化 366

第四节 纯化步骤的安排 373

第五节 样品纯度鉴定 374

第二十一章 蛋白质的序列测定… 375

第一节 序列测定前的准备 375

第二节 蛋白质分子量的测定 376

第三节 氨基酸组成分析 379

第四节 蛋白质末端氨基酸分析 381

第五节 蛋白质的部分裂解及肽片段的分离 382

第六节 肽片段的氨基酸序列测定 384

第七节 蛋白质一级结构的推定 386

第二十二章 细胞因子的检测 387

第一节 概论 387

第二节 白细胞介素的检测 389

第三节 其他细胞因子的检测 400

第七篇 分子生物学方法 408

第二十三章 核酸的提取 408

第一节 质粒DNA的制备 408

第二节 λ噬菌体DNA的提取与纯化 409

第三节 真核细胞DNA的制备 412

第四节 真核细胞RNA的制备 414

第二十四章 核酸的电泳与纯化… 416

第一节 核酸凝胶电泳的原理及影响因素 416

第二节 琼脂糖凝胶电泳 418

第三节 碱性琼脂糖凝胶电泳 419

第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 419

第五节 脉冲场凝胶电泳 420

第六节 各种凝胶电泳的应用 421

第七节 核酸片段的回收 421

第八节 核酸的层析技术 424

第九节 超速离心技术 427

第二十五章 核酸分子杂交及核酸序列分析技术 430

第一节 核酸探针的标记 430

第二节 核酸分子杂交 436

第三节 限制性片段长度多态性分析… 442

第四节 核酸序列分析技术 445

第二十六章 基因克隆 450

第一节 DNA的限制性内切酶技术… 450

第二节 目的基因的制备 451

第三节 质粒载体 451

第四节 连接反应 452

第五节 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 453

第六节 含重组质粒的细菌菌落的鉴定 454

第二十七章 基因文库的构建 455

第一节 基因组文库的构建 455

第二节 cDNA文库的构建（一） 457

第三节 cDNA文库的构建（二） 460

第二节 原核表达载体 463

第三节 外源基因的诱导表达 463

第一节 宿主细胞 463

第二十八章 外源基因在原核细胞中的表达 463

第四节 包涵体的分离与蛋白质纯化… 464

第五节 表达产物的检测 465

第六节 融合蛋白表达系统 466

第二十九章 外源基因在真核细胞中的表达 467

第一节 真核载体的基本元件 467

第二节 真核基因转移载体 468

第三节 外源基因导入真核细胞的方法 472

第四节 重组反转录病毒介导的基因转移 474

第五节 重组腺病毒介导的基因转移 475

第三十章 聚合酶链式反应 480

第一节 PCR的原理与基本操作 480

第二节 PCR引物设计 481

第三节 PCR模板的制备 482

第四节 PCR扩增产物的分析 483

第五节 PCR相关技术及应用 483

第六节 差异显示及其他PCR新技术 486

第三十一章 核酸与蛋白质互相作用的分析方法 490

第一节 宿主细胞蛋白的提取 490

第二节 DNA和蛋白质的互相作用… 492

第三节 RNA和蛋白质的互相作用… 495

第三十二章 未知基因的克隆策略 500

第一节 抑制性消减杂交 501

第二节 差异显示PCR 504

第三节 基因芯片技术 505

第四节 cDNA末端快速扩增 507

第三十三章 电子计算机在分子生物学中的应用 511

第一节 分子生物学中的数据库 512

第二节 序列同源性比较和对库同源检索 514

第三节 蛋白质结构和功能位点预测 516

第四节 实验辅助设计 517

第八篇 医学科研设计、统计学分析及医学科研结果的计算机处理 523

第三十四章 医学科研设计 523

第一节 研究设计的基本内容 523

第二节 不同场合的研究设计 525

第三节 研究设计的类型 525

第三十五章 医学统计方法 534

第一节 几个基本概念 534

第二节 统计学指标 535

第三节 t分布与t检验 537

第四节 方差分析 539

第五节 直线回归与相关 543

第一节 医学科研论文的写作 547

第三十六章 医学科研论文的写作与发表 547

第二节 医学科研论文的发表 551

第二部分 临床实验诊断方法 557

第九篇 检验质量保证和实验室数据的合理应用 557

第三十七章 检验质量保证与全程质量管理 557

第一节 分析前的质量管理 557

第二节 分析阶段的质量管理 558

第三节 分析后的质量管理 559

第三十八章 医学试验的选择和评价 560

第一节 方法的选择 560

第二节 方法学的评价 561

第三节 医学诊断试验的临床评价指标 563

第四节 用ROC曲线评价医学试验的临床准确性 565

第三十九章 医学检验结果的解释与应用 567

第一节 参考值和参考范围 568

第二节 分界值的选择 568

第三节 医学决定水平 569

第四节 医学实验室的责任和医生的任务 570

第十篇 临床一般体液检查… 572

第四十章 血液一般检验 572

第一节 基本技术 572

第二节 红细胞检查 573

第三节 白细胞检查 577

第四节 血小板计数 581

第五节 血细胞自动分析仪 582

第四十一章 血型鉴定及血清学检查 587

第一节 ABO血型鉴定 587

第二节 血型血清学常用检查方法 590

第三节 交叉配血试验 594

第一节 尿液蛋白质的分类检查 595

第四十二章 尿液检查 595

第二节 尿液化学分析仪的应用 598

第三节 尿液沉渣细胞分析仪 601

第四节 干化学法检查与显微镜检查 601

第五节 尿液沉渣染色镜检法 601

第四十三章 排泄物和分泌物检查 602

第一节 粪便检查 602

第二节 精液和前列腺液检查 604

第三节 阴道分泌物的检查 606

第四十四章 浆膜腔液检查 607

第一节 蛋白质检查 608

第二节 酶学检查 609

第三节 脂类检查 610

第四节 糖及代谢产物检查 610

第五节 免疫学检查 610

第六节 实验室方法评价 612

第十一篇 临床生物化学诊断 613

第四十五章 蛋白质测定 613

第一节 血清总蛋白、白蛋白测定 613

第二节 血清蛋白醋酸纤维素膜电泳 614

第三节 血清前白蛋白测定 615

第四节 血清肌红蛋白、肌钙蛋白测定 616

第五节 尿微量白蛋白测定 617

第六节 脑脊液蛋白质测定 617

第七节 血清C反应蛋白测定 617

第八节 糖蛋白测定 618

第九节 α1－抗胰蛋白酶测定 618

第十节 铜蓝蛋白测定 619

第十一节 转铁蛋白测定 619

第四十六章 酶学测定 620

第十二节 β2－微球蛋白测定 620

第一节 血清丙氨酸氨基转移酶测定 621

第二节 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 622

第三节 血清碱性磷酸酶测定 622

第四节 血清酸性磷酸酶测定 623

第五节 血清乳酸脱氢酶测定 624

第六节 血清γ－谷氨酰基转移酶测定 625

第七节 血清淀粉酶测定 626

第八节 血清胆碱酯酶测定 627

第九节 血清葡萄糖－6－磷酸脱氢酶测定 628

第十节 血清脂肪酶测定 629

第十一节 血清单胺氧化酶测定 630

第十二节 血清5′－核苷酸酶测定 630

第十三节 血清肌酸激酶测定 631

第十四节 血清腺苷脱氨酶测定 632

第十五节 血清α－羟丁酸脱氢酶活性测定 633

第十六节 血清β-N－乙酰氨基葡萄糖苷酶测定 634

第十七节 血清谷氨酸脱氢酶测定 635

第十八节 血清醛缩酶测定 636

第十九节 心肌梗死诊断方法与评价 636

第四十七章 糖及其代谢物测定 638

第一节 体液葡萄糖测定 638

第二节 口服葡萄糖耐量试验 640

第三节 糖化血红蛋白、血清蛋白的测定 641

第四节 尿液葡萄糖测定 642

第五节 血清乳酸、丙酮酸测定 643

第六节 酮体测定D 3－羟丁酸测定（酶） 643

第四十八章 血脂、脂蛋白、载脂蛋白测定 644

第一节 标本采集与处理 644

第二节 血清脂质测定 645

第三节 血清脂蛋白测定 647

第四节 血清载脂蛋白测定 651

第四十九章 内分泌激素测定 653

第一节 尿液17－羟皮质类固醇测定 653

第二节 尿液17－酮类固醇测定 654

第三节 尿液香草苦杏仁酸测定 655

第四节 性激素测定 656

第五节 甲状腺激素测定 658

第六节 垂体激素测定 659

第七节 胰岛素测定 661

第八节 前列腺素测定 661

第九节 环核苷酸测定 662

第十节 肽类激素测定 663

第五十章 肝功能试验 663

第一节 血清总胆红素和结合胆红素测定 664

第二节 血清总胆汁酸测定 669

第三节 血氨测定 671

第四节 肝功能试验方法选择与评价 672

第五十一章 肾功能试验 676

第一节 血清尿素（urea）测定 676

第二节 血清肌酐（Cr）测定 678

第三节 内生肌酐清除率测定 679

第四节 血清尿酸离子测定 679

第五节 肾功能试验方法选择 680

第五十二章 血清无机离子测定 682

第一节 钾、钠离子测定 682

第二节 氯离子测定 683

第三节 血钙与离子钙测定 683

第四节 无机磷测定（硫酸亚铁磷钼蓝比色法） 684

第五节 镁测定（Calmagite法） 685

第六节 血清铜、锌测定 686

第七节 血清铁及总铁结合力测定（亚铁嗪比色法） 687

第五十三章 血气分析与酸碱指标测定 689

第一节 血气分析与酸碱失衡判断的常用指标 689

第二节 血气与酸碱指标测定方法 690

第三节 血气和酸碱失衡的分析步骤与诊断方法 692

第五十四章 分子生物学技术在医学检验中的应用 697

第一节 在病原体检测中的应用 697

第二节 在遗传病早期诊断中的应用 698

第三节 在恶性肿瘤检测中的应用 701

第五十五章 治疗药物监测 702

第一节 环孢素 703

第二节 地高辛 704

第三节 茶碱 704

第五节 苯妥英 705

第四节 利多卡因 705

第六节 庆大霉素 706

第七节 甲氨蝶呤 706

第五十六章 临床毒物分析 707

第一节 乙醇 707

第二节 有机磷 707

第三节 重金属 708

第四节 其他毒物分析 710

第十二篇 临床免疫学诊断… 713

第五十七章 免疫学检测基本技术 713

第一节 酶免疫标记技术 713

第二节 免疫荧光标记技术 715

第三节 放射免疫技术 717

第四节 化学发光免疫技术 720

第五节 免疫印迹技术 721

第六节 生物素－抗生物素蛋白标记免疫技术 722

第七节 胶体金标记技术 725

第五十八章 补体检测技术 729

第一节 血清总补体活性测定 729

第二节 补体旁路途径溶血活性（AP-H测定 730

第三节 单个补体成分C3、C4等测定（单向免疫扩散法） 730

第四节 补体C3裂解产物（C3SP）测定 731

第五节 C3肾炎因子（C3Nef）测定－交叉免疫电泳测定法 732

第六节 补体溶解免疫复合物活性（CRA）测定（酶－抗酶法） 732

第五十九章 免疫球蛋白检测技术… 733

第一节 IgG、IgA、IgM检测——超微量快速免疫比浊法 733

第二节 IgD测定——酶联免疫吸附法 734

第三节 IgE测定——酶联免疫吸附法 734

第四节 IgG亚类测定——单向免疫扩散法 735

第六十章 常用肿瘤标志物检测 736

第一节 甲胎蛋白测定 736

第二节 癌胚抗原检测 738

第三节 EB病毒抗体检测 739

第四节 神经元特异性烯醇化酶测定 740

第五节 绒毛膜促性腺激素检测（放射免疫分析法） 741

第六节 糖链抗原检测 742

第六十一章 免疫细胞功能检测技术 745

第一节 T淋巴细胞转化实验——四甲基偶氮唑盐比色分析法 745

第二节 T细胞亚群测定——碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶桥联酶染色法 745

第三节 K细胞活性测定——51Cr释放法 746

第四节 NK细胞活性测定——乳酸脱氢酶释放法 747

第五节 巨噬细胞吞噬功能测定——斑蝥皮泡法 747

第六节 中性粒细胞杀菌功能测定——硝基蓝四氮唑法 748

第七节 红细胞免疫功能测定——免疫黏附法 749

第六十二章 免疫复合物的测定 750

第一节 循环免疫复合物的测定 750

第二节 特异性循环免疫复合物的测定 754

第六十三章 HLA检测技术 756

第一节 血清学分型技术 756

第二节 细胞学分型技术 757

第三节 DNA分型技术 759

第四节 补体遗传多态性的检测 761

第五节 可溶性人类白细胞抗原的检测 763

第六节 HLA抗体检测 764

第六十四章 自身抗体的检测 765

第一节 类风湿因子检测 765

第二节 抗核抗体检测 766

第四节 抗甲状腺过氧化物酶抗体检测 769

第三节 抗甲状球蛋白抗体检测 769

第五节 抗心磷脂抗体检测 770

第六节 抗肝特异性脂蛋白抗体检测 770

第七节 抗平滑肌抗体检测（间接免疫荧光法） 771

第八节 抗线粒体抗体检测（间接免疫荧光法） 771

第九节 抗精子抗体检测 772

第十节 抗子宫内膜抗体检测 772

第六十五章 病毒性肝炎的免疫学检测 773

第一节 甲型肝炎的免疫学检测（ELISA法检测HAV-IgM） 773

第二节 乙型肝炎的血清学检测 774

第三节 丙型肝炎的血清学检测 777

第四节 丁型肝炎的免疫学检测 779

第五节 戊型肝炎的血清学检测 780

第六节 庚型肝炎的血清学检测（RT-PCR检测HGV-RNA） 781

第一节 医院内感染及其病原微生物 782

第十三篇 临床微生物诊断… 782

第六十六章 医院内感染及实验室诊断 782

第二节 医院内感染的实验室监测 786

第六十七章 性病实验室检查 795

第一节 淋病实验室检查 795

第二节 梅毒实验室检查 797

第三节 非淋菌性尿道炎实验室检查 800

第四节 性病性淋巴肉芽肿实验室检查 803

第五节 软下疳实验室检查 804

第六节 细菌性阴道病实验室检查 804

第七节 艾滋病实验室检查 805

第六十八章 传染病的实验室诊断… 808

第一节 分枝杆菌的实验室诊断 808

第二节 出血性大肠埃希菌O157:H7的实验室诊断 814

第三节 志贺菌属的实验室诊断 815

第四节 沙门菌属的实验室诊断*817++第五节 霍乱弧菌属的实验室诊断 820

第六节 O139型霍乱弧菌 823

第六十九章 监控抗感染治疗的实验室试验 824

第一节 需氧菌和兼性厌氧菌的体外抗菌药物敏感性试验 824

第二节 厌氧菌的体外抗菌药物敏感试验 840

第三节 酵母样真菌的体外抗菌药物敏感试验 841

第四节 结核分枝杆菌的体外抗菌药物敏感试验 842

第十四篇 临床血液学实验诊断 846

第七十章 骨髓检查 846

第一节 骨髓检查的适应证*846++第二节 骨髓细胞学检查 846

第三节 常见血液病骨髓象检查 855

第七十一章 红细胞及血红蛋白病的检测 862

第一节 贫血的实验室诊断 862

第二节 溶血性贫血的实验诊断 866

第三节 珠蛋白合成异常的检验 873

第七十二章 止血与血栓性疾病检验 877

第一节 概述 877

第二节 凝血仪临床应用 878

第三节 血管壁检验 883

第四节 血小板检验 885

第五节 凝血因子检测 890

第六节 生理性抗凝蛋白检验 892

第七节 病理性抗凝物质检验 892

第八节 纤溶活性检验 892

第九节 弥散性血管内凝血实验诊断 893

第七十三章 血液流变学检验 894

第一节 血液黏度的检测 894

第二节 血浆黏度测定 895

索引 896