细胞生物学与医学遗传学实验PDF电子书下载

实验室规则及报告要求 1

第一部分 医学细胞生物学实验 3

实验一 普通光学显微镜的结构及使用 3

一、显微镜的构造 4

二、显微镜的使用方法 6

三、操作练习 7

四、使用显微镜的注意事项 8

实验二 细胞基本形态与结构 11

一、人口腔黏膜上皮细胞的制片与观察 11

二、洋葱鳞茎表皮细胞的制片与观察 12

三、大白鼠小肠上皮切片的观察 13

四、骨骼肌纵切片的观察 13

五、平滑肌纵切片的观察 14

六、猪、兔、牛等脊髓灰质前角神经细胞涂片的观察 14

七、蛙（或蟾蜍）血涂片标本的制作与观察 14

实验三 细胞的生理活动 17

一、红细胞膜的通透性和溶血现象的观察 18

二、细胞运动现象的观察 19

三、巨噬细胞吞噬现象的观察 19

实验四 细胞器的分级分离 21

一、细胞核的分离 22

二、线粒体的分离 23

三、溶酶体的分离 23

四、微粒体的分离 23

实验五 细胞骨架的制备与观察 25

一、考马斯亮蓝R250染色法观察微丝 26

二、间接免疫荧光法观察微管 26

实验六 细胞中线粒体的活体染色 29

实验七 细胞有丝分裂 31

一、植物细胞有丝分裂 32

二、马蛔虫卵细胞的有丝分裂 33

实验八 细胞减数分裂 36

一、蝗虫精巢生殖细胞减数分裂 37

二、小鼠睾丸生殖细胞减数分裂标本制备 40

实验九 小鼠骨髓细胞染色体制备与观察 42

一、小鼠骨髓细胞染色体制备 43

二、小鼠骨髓细胞染色体观察 44

三、G显带小鼠染色体核型 45

实验十 细胞原代培养 47

一、实验预备 48

二、操作与观察 48

实验十一 细胞融合和染色体提前凝集（PCC）技术 52

一、细胞融合的诱导与观察 53

二、染色体提前凝集（PCC）标本的制备（见图11-2） 55

实验十二 细胞的冻存与复苏 59

一、培养细胞的冻存 60

二、培养细胞的复苏 60

第二部分 医学遗传学实验 62

实验十三 人类性染色质标本的制作与观察 62

一、X染色质的制备与观察 63

二、Y染色质的制备与观察 64

实验十四 人类皮肤纹理分析 67

一、皮纹资料印取方法 68

二、皮肤纹理的分析 69

三、遗传病的皮纹变化 75

实验十五 遗传病的系谱分析 78

实验十六 人类遗传性状的观察与分析 85

一、人类ABO血型的检测和遗传分析 85

二、人类苯硫脲尝味能力的遗传分析 88

三、人体常见性状的群体遗传分析 90

附录 人类部分性状与遗传机制 94

实验十七 苯丙酮尿症的诊断与筛查 96

一、PCR-STR法诊断苯丙酮尿症 97

一、基因组DNA的提取 98

二、PCR扩增目的基因片段 98

三、PCR产物的检测 99

四、结果分析 99

二、苯丙酮尿症的筛查 100

一、Guthrie细菌抑制法 100

二、FeCl3筛查试验 100

实验十八 PCR-RFLP技术在甲型血友病基因诊断中的应用 102

一、基因组DNA的提取 103

二、PCR扩增目的基因片段 104

三、PCR产物的鉴定 104

四、限制性内切酶酶切 104

五、电泳分型 104

六、结果分析 104

实验十九 核仁形成区与随体联合的银染与观察 106

实验二十 Southern印迹杂交 109

一、获得PUC19质粒DNA（由老师准备） 111

二、质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳 111

三、Southern转移 111

四、Southern杂交 112

五、放射自显影 112

实验二十一 PCR-SSCP分析技术在p53基因突变诊断中的应用 114

一、PCR反应 115

二、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 116

三、聚丙烯酰胺凝胶染色 117

四、结果分析 117

第三部分 综合性实验 120

实验二十二 人类染色体标本的制备与分析 120

一、人类外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 121

二、人类体细胞染色体的核型分析 124

三、人类体细胞G显带染色体标本的制作、观察与核型分析 129

实验二十三 运用细胞遗传学技术进行遗传毒理效应的检测 137

一、致染色体畸变的方法与观察 137

二、微核测定法检测哺乳动物骨髓细胞染色体畸变 140

三、姐妹染色单体分化染色和姐妹染色单体互换标本的制备与分析 143

实验二十四 血管紧张素转换酶基因多态性分析与检测 147

一、人血细胞基因组DNA的提取 148

二、聚合酶链反应扩增ACE基因 149

三、PCR产物的电泳分析 151

四、ACE基因多态性的统计分析 153

实验二十五 细胞传代培养及增殖动力学检测 154

一、细胞的传代培养 154

二、生长曲线的测定 157

三、有丝分裂指数的测定 159

四、克隆（集落）形成实验 162

第四部分 研究性实验 164

实验二十六 荧光原位杂交技术及应用 164

实验二十七 流式细胞技术在生物医学研究的应用 170

一、实体瘤组织细胞周期检测 174

二、细胞凋亡检测 177

附录 181

一、器械的清洗与灭菌 181

二、部分溶液和细胞培养基的配制 182

三、化学试剂的分级和保存方法 189

四、一些常用单位 190

五、核酸、蛋白质换算数据 192

六、希腊字母表 193