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第一章 光谱光度分析技术 1

第一节 光谱光度分析的基本原理 1

一、光的一般概念 1

第一篇 1

二、光的电磁理论 2

三、发射光谱与吸收光谱 3

四、物质结构与光谱的关系 3

(一)物质结构与发射光谱的关系 3

(二)物质结构与吸收光谱的关系 4

(一)定性分析 6

第二节 发射光谱分析技术 6

一、简介 6

(二)定量分析 7

二、摄谱仪的基本构造 7

(一)电光源 7

(二)色散系统 8

(三)检测器 8

三、火焰光度计 8

四、原子荧光光谱仪 10

第一节 概述 11

第三节 吸收光谱分析技术 11

第二章 电泳技术 11

第二节 电泳的基本原理 12

第三节 影响电泳的因素 14

一、电场强度 14

二、缓冲液 15

三、支持物 18

(一)吸附 18

(二)电渗 18

第四节 电泳的称呼和类别 19

(三)支持物的分子筛作用 19

第三章 层析技术 20

第一节 层析的一般原理和分类 20

一、层析的一般原理 20

二、层析法的分类 21

第二节 吸附层析 22

一、吸附等温线 23

二、分配系数与保留值 24

三、吸附柱层析法 25

四、吸附薄层层析法 30

一、原理 36

第三节 分配层析技术一纸层析法 36

二、操作技术 37

第四节 反流分布法 40

一、基本原理 40

二、操作技术 42

第五节 离子交换层析 43

一、离子交换剂的结构与分类 43

二、离子交换树脂的特性 49

三、离子交换理论 50

四、应用与实例 52

第六节 凝胶层析法 53

一、基本原理 53

二、凝胶 55

三、凝胶层析的实验技术 58

四、影响凝胶层析的因素 59

五、防止微生物污染凝胶的方法 63

六、凝胶的再生 64

七、凝胶层析法的应用 64

第七节 亲和层析法 66

一、基本原理 66

二、操作 71

三、亲和层析法实例 78

第四章 临床生化检验的质量控制 82

第一节 概念 82

一、临床生化检验的质量控制 82

二、检验误差 82

三、回顾性质量控制的统计学基础 83

四、以平均值？±？SD估计变量值的频数分布 84

二、控制血清的定值 85

三、室内质控允许误差的确定 85

一、控制血清的准备 85

第二节 室内允许误差的确定和质控图的制作 85

四、室内质控图的制作及例题分析 86

五、平均值和全距法质控图 87

第三节 方法考查提要 90

一、精密度试验 90

二、准确度试验 90

三、比较两种方法的测定均数差异是否显著 91

四、比色法标准工作曲线的校正 91

第五章 超速离心分析法 92

第一节 引言 92

一、一般原理 92

(一)沉降速度法 94

(二)沉降平衡法 95

第二节 基本数学理论 97

一、沉降系数与分子量测定 97

(一)沉降系数 97

(二)分子量测定 98

二、沉降速度与分子量测定 101

(一)浓度测定与平方稀释定律 101

(二)分子量测定 103

一、油涡轮超速离心机 104

第三节 仪器设备 104

二、气动超速离心机 105

三、电动超速离心机 106

四、制备用超速离心机 106

第四节 超速离心沉降界面的观察方法 108

一、柱面透镜法 108

二、光干涉法 111

三、光吸收法 112

第五节 实验方法 113

一、实验溶液的准备 113

二、离心管 114

三、离心管帽 115

四、离心池 116

(一)单孔离心池 116

(二)双孔离心池 116

五、区带离心法 117

(一)差速与等密度区带离心法 118

(二)密度梯度溶液的制备 119

1.直线型密度梯度溶液的配制 119

2.指数曲线型密度梯度溶液的配制 120

一、牛血清白蛋白沉降系数的测定 122

第六节 超速离心实例 122

六、区带离心法的分离能力 122

二、用差速离心法从鼠肝中提纯核蛋白体、及核蛋白体RNA 123

三、用蔗糖梯度离心法分部分离核糖核酸 124

第六章 试剂配制 126

第一节 概述 126

第二节 临床生化检验常用的各种浓度试剂 127

一、百分浓度(%) 127

二、克分子浓度(M或mol/L) 127

三、当量浓度(N)和毫克当量浓度(mEq/L) 127

一、配制方法及要求 128

第三节 溶液配制 128

四、比例浓度 128

二、有关浓度的换算 132

第七章 玻璃器材的备用 138

第一节 玻璃器材的消毒、清洁和存放 138

第二节 玻璃量器的使用方法 139

一、玻璃量器的种类、构造及用途 139

二、玻璃量器的使用规则 141

第三节 玻璃量器的校正 143

一、滴定管的校正 146

二、吸量管的校正 147

三、微量吸管的校正 148

三、容量瓶的校正 148

第八章 药物对生化检验的干扰 150

第二篇 155

第一章 临床基本操作技能 155

第一节 静脉采血 155

一、注射器 155

二、皮肤消毒 155

三、肘前静脉采血 155

一、草酸钾 156

第二节 抗凝剂及其应用 156

五、颈静脉采血 156

四、腕背静脉采血 156

六、动脉采血 156

二、草酸钠 157

三、肝素 157

四、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2) 157

五、采血后怎样获取全血，血浆血清 157

二、容器 158

三、保存方法 158

一、收集量 158

第三节 尿液标本的采取 158

第四节 无蛋白滤液制备 159

一、钨酸除蛋白法 159

二、三氯醋酸法 159

第二章 血液葡萄糖测定 160

第一节 概述 161

第二节 血液葡萄糖测定 161

一、磷钼酸显色法(Folin-吴宪二氏法) 161

二、邻甲苯胺法 164

三、葡萄糖氧化酶法 166

二、操作 170

一、原理 170

第三节 糖耐量试验 170

三、附注 171

四、临床意义 171

第三章 血液蛋白质及非蛋白氮测定 172

第一节 概述 172

第二节 血清总蛋白、白蛋白、球蛋白测定 174

一、微量定氮法 174

二、双缩脲法 176

第三节 非蛋白氮测定 179

一、纳氏比色法 179

二、次亚溴酸钠法 182

二、磷钨酸一氰化钠法 184

第四节 尿素氮测定 184

一、二乙酰一肟法 185

二、脲酶法 187

第五节 肌酐测定 188

第六节 肌酸测定 190

第七节 尿酸测定 192

一、磷钨酸钠显色法 192

三、磷酸三钠法 196

第八节 血氨测定 197

第四章 血脂测定 202

第一节 概述 202

一、硫磷铁法 204

第二节 血清总胆固醇测定 204

二、硫酸-邻苯二甲醛法 206

三、硫酸-醋酐法 207

第三节 血清甘油三酯测定 208

一、正庚烷-异丙醇-乙酰丙酮法(简易快速法) 209

二、醇-醚-氯仿提取法 211

第四节 血清β脂蛋白测定(肝素比浊法) 214

第五节 血清总脂测定 216

第六节 血清磷脂测定 218

一、高氯酸消化法 218

二、氨基萘酚磺酸法 220

第七节 血清游离脂肪酸测定 221

第八节 酮体测定 223

第一节 概述 226

第五章 无机元素测定 226

第二节 血清钾测定 227

四苯硼钠比浊法 227

附：尿钾测定 231

第三节 血清钠测定 232

一、焦性锑酸钾比浊法 232

二、醋酸双氧铀镁-亚铁氰化钾间接比色法 233

第四节 血清钾、钠火焰光度法 236

一、直接法 236

二、内标法 238

硝酸汞滴定法 240

第五节 氯化物测定 240

第六节 血清钙测定 243

一、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)滴定法 244

二、邻甲酚酞络合剂比色法 246

附：尿钙测定(EDTA-Na2滴定法) 249

第七节 血清无机磷测定 250

一、硫酸亚铁磷钼篮比色法 250

二、氨基萘酚磺酸磷钼篮比色法 253

附：尿无机磷测定(硫酸亚铁磷钼篮比色法) 254

第八节 铁测定 255

一、血清铁的测定(双联吡啶比色法) 257

二、血清(浆)总铁结合力测定 259

三、全血铁测定(硫氰酸铁比色法) 261

第九节 血清镁测定 263

达旦黄比色法 264

第十节 铜测定 266

一、血清铜二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法 267

二、尿铜测定(尿酮二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法) 268

三、血清铜二苯基羰酰二肼比色法 269

第十一节 血清锌测定 271

吡啶偶氮萘酚比色法 272

第六章 血清酶类测定 274

第一节 概述 274

第二节 转氨酶测定 275

一、谷丙转氨酶(GPT)测定 276

二、谷草转氨酶(GOT)测定 278

一、碱性磷酸酶测定 280

第三节 磷酸酶测定 280

二、酸性磷酸酶测定 286

第四节 淀粉酶测定 287

第五节 胆碱酯酶测定 289

一、胆碱酯酶测定 289

二、全血胆碱酯酶测定 292

第六节 磷酸肌酸激酶测定 294

第七节 5′-核苷酸酶测定 297

第八节 γ-谷氨酰转肽酶测定 299

第九节 单胺氧化酶测定 302

第十节 乳酸脱氢酶测定 304

第十一节 醛缩酶测定 307

第七章 肝脏功能试验 311

第一节 和蛋白质有关的肝功能试验 311

一、血清蛋白定量测定与电泳 311

二、血清浊度和絮状试验 313

三、甲胎蛋白试验 321

五、血氨测定 322

四、和某些凝血因子有关的试验 322

第二节 和脂类代谢有关的试验 323

一、血清总胆固醇测定 324

二、卵磷脂胆固醇酰基移换酶的测定 324

第三节 和肝脏病有关的血清酶类试验 324

一、反映肝细胞损伤的酶类 324

二、反映胆道梗塞的酶类 326

第四节 有关胆色素代谢的肝功能试验 328

一、血清胆红素测定 328

三、反映肝纤维化的酶类 328

二、尿中胆红素、胆素原及胆素的测定 337

一、血清磺溴酞钠潴留量测定 338

第五节 有关生物转化与排泄的肝功能试验 338

二、靛青绿(ICG)排泄试验 343

第六节 肝功能试验的选择 343

一、肝脏功能检查的原则 344

二、对某些肝功能试验在临床应用的评价 344

三、肝脏功能试验的选择 349

第八章 内分泌测定 350

第一节 尿17-酮类固醇测定 350

第二节 尿17-羟类固醇测定 350

一、正丁醇提取法 353

二、氯仿-正丁醇-乙醇提取法 355

第三节 尿中儿茶酚胺测定 356

第四节 3-甲氧基-4-羟苦杏仁 359

酸测定 362

第五节 血清蛋白结合碘测定 362

第九章 血液气体分析及pH测定 364

第一节 血液气体和酸碱平衡紊乱诊断的基本概念 364

二、血液中含氧量的计算 367

一、气体分压及其在血液中溶解量的计算 367

三、血液中CO2、Tco2和HCO？含量及pH的计算 368

四、酸 平衡指标 369

第二节 血标本的采集和保存 373

一、密闭式动脉或静脉取血法 373

二、毛细血管血的采取法 373

三、血液标本的贮存 374

第三节 血氧测定法 375

一、氧分压测定--氧分压电极法 375

二、血氧饱合度测定 378

第四节 血液二氧化碳测定 397

一、二氧化碳分压测定 397

二、血浆碳酸氢根测定(滴定法) 403

三、血浆总二氧化碳测定(量气法) 404

一、血浆pH计法 411

第五节 血液pH测定 411

二、酚红比色测定法 414

第六节 各项酸碱平衡诊断指标的计算 417

一、pH-Pco2法 417

二、单-CO2气平衡法 418

三、两种CO2气平衡法 418

第七节 血液气体分析和PH测定的临床意义 422

一、正常范围和生理变动 422

二、呼吸功能诊断 423

三、酸碱平衡诊断 425

第十章 临床电泳 430

第一节 血清蛋白质电泳 430

一、血清蛋白质纸电泳法 430

二、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 433

第二节 血清脂蛋白电泳 435

一、醋酸纤维薄膜电泳 435

二、琼脂糖电泳法 438

三、预染脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘电泳) 439

第三节 血清乳酸脱氢酶(LDH)同功酶电泳 445

第四节 对流免疫电泳 448

一、酸碱指示剂 449

附录： 449

二、生化实验常用缓冲液的配制方法 451

三、市售常用酸碱的浓度 455

四、实验室工作常用的度量衡单位 455

五、某些溶剂的沸点、比重及介电常数 458

六、乙醇的用水稀释法(15.6℃时) 459

七、原子量表 460

三、血氧含量测定-量气法 784